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菊欧文氏菌银胶菊致病变种PCR试剂盒132300
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详细内容
英文名称:Erwiniachrysanthemipv parthenii
菊欧文氏菌银胶菊致病变种PCR试剂盒,它具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品核酸模板。
2.引物和探针经过优化,分析灵敏性高。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5.既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。
6.本产品足够50次20µL体系的探针法荧光定量RT-PCR反应。
本产品只能用于科研。
探针法的如下:
一、稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/µL这6个10倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。菊欧文氏菌银胶菊致病变种PCR试剂盒内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果:将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
四、结果分析
1. 如果制作标准曲线,则以阳性对照浓度的log 值为横轴,以Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的Ct 值从标准曲线上推算出样品DNA 浓度的log 值,推算出其浓度。
2. 如果未制作标准曲线,按照如下标准判定结果:阳性对照(1×10E5 拷贝/µL)结果:Ct 值<30,有明显指数增长,呈典型的 S 型曲线。阴性对照结果:Ct 值>40 或无 Ct 值,无明显指数增长期和平台期。样本检测结果:Ct 值<38,有明显指数增长,表明样本中检测出该病毒,结果为阳性;Ct 值>40 或无 Ct 值,表明样本中未检测出该病毒,结果为阴性;Ct 值在 38-40 范围,应对样本进行复检,如重复实验结果 Ct 值仍在 38-40 范围,有明显指数增长,则判定为阳性,否则为阴性。
运输及保存低温运输:-20℃保存,保存期限为12个月。
自备试剂:样品DNA/RNA,超纯水。
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