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技术文章
超微量分光光度计NanoDrop ONE校准与日常清洁方法
点击次数：1615 发布时间：2025/11/3 10:28:45
超微量分光光度计是分子生物学实验室中不可或缺的精密仪器。赛默飞世尔的 NanoDrop ONE/ONEC 因其高精度和便捷性而广受欢迎。正确的校准和日常清洁是保证其准确性和延长使用寿命的关键。
下面为您详细介绍 NanoDrop ONE 的校准与日常清洁方法。
核心原则：先清洁，后测量
在使用 NanoDrop ONE 进行任何测量之前，清洁是要务。残留的样本会严重影响后续所有测量的准确性。
一、 日常清洁方法（每次使用前后）
这是最频繁、最重要的操作，旨在确保测量基座和样本回收臂的绝对洁净。
所需清洁用品
超纯水：，用于大多数水溶性样本的清洁。
70% 乙醇：用于去除蛋白质残留和消毒，挥发性好。
无尘擦镜纸：专用，柔软且不起毛，切勿使用普通纸巾或实验室擦手纸，它们会划伤光学表面。
专用清洁剂：对于顽固残留（如高浓度核酸、蛋白质、油脂），可使用赛默飞专用的 NanoDrop 清洁套件。
标准清洁步骤
降下样本臂：打开仪器，让两个基座暴露出来。
初步湿润：用移液器吸取 1-2 µL 超纯水，滴加到下面的下基座上。
合上与擦拭：轻轻合上上基座（样本臂），让水润湿两个表面。然后拉开样本臂，用一张新的无尘擦镜纸，以单向画圈的方式轻轻擦拭两个基座，直到完全干燥。
（可选）深度清洁：如果上一步仍有残留，重复步骤2和3，但使用 70% 乙醇代替超纯水。乙醇能更有效地溶解蛋白质和脂类。
最终冲洗：再次使用 1-2 µL 超纯水，重复步骤2和3，确保去除乙醇残留。
检查：在灯光下检查两个基座，应呈现出光洁、无水渍、无划痕的状态。任何可见的污渍或彩虹色光晕都意味着没有清洁干净。
处理顽固残留
高浓度样本：如高浓度基因组DNA、BSA等，直接使用 NanoDrop 专用清洁剂，按照说明书操作。
避免刮擦：绝对不要用任何尖锐物体（如枪头、镊子）刮擦基座表面，这会造成性损伤。
二、 校准方法
NanoDrop ONE 的校准分为两个层面：用户日常校准（光谱基线校准） 和 由工程师执行的硬件校准。
1. 用户日常校准（光谱基线校准）
这不是传统意义上的“校准”，而是建立基线。每次开机或更换测量模块后，都必须执行此操作，以扣除空白（通常是纯水）的背景吸收。
操作步骤：
确保基座洁净：按照上述“日常清洁方法”清洁两个基座。
选择测量模块：在仪器主屏幕上选择您要使用的测量模块（如 Nucleic Acid, Protein, UV-Vis 等）。
执行基线校准：
在所选模块的界面中，点击 “Blank” 或 “基线” 按钮。
仪器会提示您降下样本臂。
用移液器吸取 1-2 µL 用于溶解样本的溶剂（通常是超纯水或特定缓冲液）滴加到下基座上。
合上样本臂，仪器会自动进行扫描。
校准完成后，屏幕会提示成功，样本臂会自动弹开。
开始测量：基线校准成功后，即可开始加载样本进行测量。
重要提示：
每次更换测量模块都必须重新做基线校准！
基线校准所用的液体必须与您样本的稀释液完全一致。 例如，如果您的样本溶解在 TE Buffer 中，那么做基线时也必须使用 TE Buffer。
2. 硬件校准（由赛默飞工程师执行）
这是对仪器内部光学系统、波长准确性和光度准确性的校准。用户无法自行操作。
校准周期：通常建议 每年进行一次，或在仪器出现明显故障、移动到新环境后进行。
校准内容：工程师会使用专用的标准品（如已知浓度的重铬酸钾溶液、钬玻璃等）来校准仪器的波长精度、吸光度精度和杂散光等关键参数。
用户操作：当您怀疑仪器数据不准（例如，测量标准品的结果偏差很大），或到了年度维护时间，您需要联系赛默飞的售后服务，安排工程师上门进行专业校准和维护。
三、 日常维护与最佳实践
保持环境干燥：仪器应放置在湿度较低的环境中，防止光学元件发霉。
及时清理：任何样本溅出后，立即按照清洁步骤进行清理，防止其干涸。
使用原厂耗材：尽量使用赛默飞原厂的基座盖板和清洁套件，以确保最佳兼容性和效果。
定期检查：每周或每月，可以使用已知浓度的标准品（如 dsDNA 或 BSA）进行测量，监控仪器的性能稳定性。如果测量值持续偏离预期，可能需要进行硬件校准。
软件更新：保持仪器软件为版本，以获得最佳性能和新功能。
总结
操作类型 执行者 频率 目的 关键点
日常清洁 实验用户 每次测量前后 去除残留，保证单次测量准确性 先清洁，后测量；使用超纯水和无尘纸
基线校准 实验用户 每次开机或更换模块后 扣除溶剂背景，建立测量零点 使用与样本一致的溶剂做空白
硬件校准 赛默飞工程师 每年一次或故障时 校准光学硬件，保证仪器长期准确性 联系售后服务，用户无法自行操作
遵循以上方法，您的 NanoDrop ONE 将能长期保持最佳工作状态，为您提供准确、可靠的实验数据。
注：文章来源于网络，如有侵权，请联系删除
原创作者：上海聚慕医疗器械有限公司
