细胞介绍

RH-35细胞株源自由N-2feuorenyldiuctamid在雄性AxC大鼠中诱导的可移植Reulier H-35肝癌。细胞较小，饥饿24小时可以使其同步。

参数规格

来源：大鼠，肝癌
形态：上皮细胞样，贴壁生长
含量：>1x10⁶ 个/mL
污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

RH-35 大鼠肝癌细胞/STR鉴定

储存方式

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：

（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；

（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。

应用域

仅供科研使用。

细胞接收后的处理：

1） 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2） 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3） 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml新的完全培养基。

4） 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。

5） 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

RH-35 大鼠肝癌细胞/STR鉴定

操作流程

一．培养基及培养冻存条件准备：

准备DMEM-H培养基(DMEM-H，GIBCO，货号12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。（DMEM液体培养基：GIBCO，11995-065）。
培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二． 细胞处理：

复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
RH-35 大鼠肝癌细胞/STR鉴定

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

主要产品和技术服务：

一、原代细胞服务

各类模式哺乳动物的多种原代细胞资源；

多种人源性正常及肿瘤原代细胞资源；

原代细胞分离和培养相关试剂、kit、培养基添加剂等；

原代细胞相关技术服务和整体实验外包服务；

二、细胞株/系服务

细胞株/系培养、增殖、冻存和相关说明书；

细胞系培养过程的技术指导；

细胞系培养基、添加剂、血清及相关生长因子、试剂等；

三、iPS细胞

iPS细胞基础培养（有滋养层or无滋养层在）；

iPS细胞增殖及冷冻保存；

iPS基础培养技术实习；

新药及实验仪器上市评估；

四、技术外包服务：各类细胞生物学实验、分子生物学实验、显微镜拍照服务等

五、其他：根据客户需要定制服务等