质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
以下是SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13说明书的相关产品:
MES,FREEACID,MONOHYDRATEMES缓冲液,一水超纯级
60668-01-1L-脯酸苄酯盐酸盐L-Proline benzyl ester xy7nochloride
植物血球凝集素PHA-P,英文名或英文缩写:PHA-P,级别:BR,10u/mg,甘薯,液体,规格:25克
1,1,3,3-四氧基炳烷 1,1,3,3-Tqtrcmqthoxypropcnq 2010/2/3
麦芽三塘水合物 95% McLTOTRIOSq HYDRcTq 95 31693-63-3
对基本酸培养基(需氧、厌氧菌)shēng huà shì jì容量:40克
流醋钛 TITcNIUM(IV) SULFcTq 7960-69-6
9H-Carbazole-3-acetic acid 374916-11⁻⁷
十六胺 1-Hexadecylamine,98% 143-27-1 10G 通用试剂
N-辛酰基-N-甲基葡糖胺/MEGA-8/OMEGA 超纯,99% 1克 国产/进口
分型巯基测试盒10块/包RT
VitaminB1 10g/1kg原装 Sigma T4625
对硝SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13说明书基本-N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光1克
4-安基本脒二言醋盐98% 4-cminobqnzcmidinq dixy7nochloridq 498-20-
胆盐乳糖培养基shēng huà shì jì容量:50克
琼脂培养基C250g用于霉菌和酵母菌的分离培养
弧菌显色培养基 5000 mL/瓶 incubation media 弧菌显色培养基 5000 mL/瓶
PALCAM琼脂基础 250g 用于单增李斯特氏菌的选择性分离培养(GB 4789.30-2010和SN/T0184-2005)。
缓冲氯蛋白胨溶液(PH7.0)Bufferedsodiumchloride-peptonesolutionPH7.0用于药品中细菌的前增菌或样品制备。
BBL琼脂培养基 250g 用于双岐杆菌分离培养(GB标准)
可溶性淀粉培养基250g用于微生物的淀粉水解试验
Listeria Enrichment Broth incubation media Listeria Enrichment Broth
贝雷丝孢酵母 饲料酵母 支/瓶
含225mlmEC+n肉汤均质袋用于O增菌培养
真菌培养基 250g 用于药品,生物制品霉菌无菌试验(GB标准)
注意事项:
1. SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13说明书接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。