本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。产品名称:查菲艾利希体(查菲埃立克体)探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:Ehrlichia chaffeensis
货号:GOY-M3186
分类:荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。

产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。产品仅用于科研
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄为止定量准确,重现性好的定量方法,已得到全的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多域。
Pick’sBrothBaseB
多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基 Poly Peptone Yeast Extract Medium 用于产气荚膜梭菌的培养(SN标准)
检验肉汤 E.Coli Broth 250克 粪大肠菌群、的检验
乳糖胆盐发酵培养基用于大肠菌群,粪大肠菌群,的测定(GB标准)incubationmedia乳糖胆盐发酵培养基用于大肠菌群,粪大肠菌群,的测定(GB标准)
哥伦比亚CNA琼脂基础 250g 用于分离革兰氏阳性球菌
LPM添加剂每支添加于200mlHB4189中
N6培养基 N6 Medium 用于植物组织培养
动力吲哚鸟氨酸培养基 MIO Medium 250克 动力、吲哚和鸟氨酸试验
选择性APS超肉汤基础250g/瓶非动物源配方,用于培养重组菌株,提高质粒产量incubationmedia选择性APS超肉汤基础250g/瓶非动物源配方,用于培养重组菌株,提高质粒产量
滤膜肠球菌琼脂 250g 用于水或其他样品中肠球菌的滤膜法分离或计数
克氏铁琼脂 KIA 100克 肠杆菌科的初步鉴定
脱氧胆酸琼脂 DCLA 250克 大肠菌群的平板测定以及肠道菌的选择性培养
中国蓝琼脂 China Blue Lactose Agar 250克 弱选择性培养基,肠道致病菌选择分离
胆盐硫乳琼脂培养基 DHL Agar 250克 沙门氏菌和志贺氏菌的分离培养
查菲艾利希体(查菲埃立克体)探针法荧光定量PCR试剂盒结直肠腺癌细胞;SW620 [SW 620;SW-620]
CL-0380MDA-MB-157(癌细胞)5×106cells/瓶×2
EPHA4 Others Human EphA4 / HEK8 (aa 570-986) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
NIH/3T3, 小鼠成纤维细胞系 肾癌Wilms,G-401细胞 NCI-H1869 [H1869](肺癌细胞)
SV40T转化脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1
ESAM Others Human ESAM 细胞裂解液 (阳性对