服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
| 牛疱疹病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒 | Bovine Hepervirus 2 (BHV-2)2 | 详见说明书 | GOY-M3007 |
注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。

实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
D-甘露醇发酵管(枯草芽孢杆菌)20支用于枯草芽孢杆菌生化试验
Tergitol⁻⁷琼脂 Tergitol⁻⁷ Agar 用于大肠菌群的鉴定。
血液琼脂基础 Blood Agar Base 250 供分离营养要求较高的致病菌用,后加血液制成血平板
玉米粉琼脂培养基250g/瓶用于真菌培养incubationmedia玉米粉琼脂培养基250g/瓶用于真菌培养
SorbitolMaconkeyAgarBase
IronAgar
Test agar fo the residue test acc.to KUNDRAT测试琼脂(残余测试) 1.10662.0500 MERCK默克 incubation media Test agar fo the residue test acc.to KUNDRAT测试琼脂(残余测试) 1.10662.0500 MERCK默克
西蒙氏柠檬酸盐培养基 100g 用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验
结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)300ml/袋*大肠菌群的固体平板检测
MannitolMe
改良0酸盐缓冲液PSB 250 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养 (GB标准) incubation media 改良0酸盐缓冲液PSB 250 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增菌培养 (GB标准)
ITC 肉汤 250 用于分离培养耶尔森氏菌(ISO方法) incubation media ITC 肉汤 250 用于分离培养耶尔森氏菌(ISO方法)
CIN-1I培养基基础 250 用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 (GB标准) incubation media CIN-1I培养基基础 250 用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 (GB标准)
消毒灭菌效果评价 incubation media 消毒灭菌效果评价
胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]
小鼠畸胎瘤细胞;P19
PILRA Others Human PILR-alpha / PILRA 细胞裂解液 (阳性对照)
中国仓鼠卵巢细胞系;pDSr a2-mpl-X 骨髓瘤细胞,P3X63Ag8细胞 Bv-2细胞,小鼠小胶质瘤细胞
卵巢癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml
PILRA Others Mouse 小鼠 PILRA 细胞裂解液 (阳性对照)
牛疱疹病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒使用方法:
一、样品 DNA 的制备 产品仅用于科研
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。