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详细内容
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| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 亚细胞结构蛋白提取试剂盒 | Subcellular Structure Protein Extraction Kit | 50次 |
概述
本试剂盒是门针对从各种动物细胞中快速高效地抽提分离不同亚细胞蛋白质组份而设计的。运用含有不同去污剂的抽提试剂,按照亚细胞结构对动物细胞进行有序的抽提,可将细胞内的蛋白依次分离成四部分,分别是:胞浆蛋白、细胞膜和细胞器膜蛋白、核蛋白、细胞骨架(微丝和中等纤维)蛋白和核基质蛋白。可广泛运用于各种相关的细胞生物学实验,如蛋白质(酶)的亚细胞定位、内(外)源性因子亚细胞定位以及在细胞骨架网络中的作用。本试剂盒每次可以从5×106悬浮或贴壁培养的细胞中提取几乎所有蛋白质,可以使用50次。

特点
每次可以从5×10^6悬浮或贴壁培养的细胞中提取几乎所有蛋白质;
提取的蛋白绝大多保持原有活性和完整性;
根据不同蛋白质在不同去污试剂中溶解能力的不同,将细胞中的蛋白质有顺序地提取,可以增加蛋白质的提取效率和蛋白质的点数;
整个实验过程只需要2h左右。
应用
分离得到的各蛋白组份可直接用于1D和2D电泳分析、Western Blot分析、酶活测定和蛋白定位研究等。
Solvent Yellow 3 97-56-3 中文名:溶剂黄 分子式:C14H15N3 度:99.0% 关键词: 小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISAKit
Solanesol 13190-97-1 中文名:茄尼醇 分子式:C45H74O 度:% 关键词: 抗氧化; 抗菌; 烟草; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠c-fosELISAKit
prasterone sulfate 1099-87-2 中文名:去氢表雄酮硫酸钠盐 分子式:C19H27NaO5S 度:98.0% 关键词: 小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)ELISA试剂盒
cholate 361-09-1 中文名:胆酸钠 分子式:C24H39NaO5 度:98.5% 关键词: 胆烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)ELISA试剂盒
Sitosteryl palmitate 2308-85-2 中文名:β-谷甾醇棕榈酸酯 分子式:C45H80O2 度:90.0% 关键词: 豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒
去甲黄腐醇 HPLC≥95% 20mg 小鼠细胞色素P450家族成员7A1(CYP7A1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP7A1 ELISA Kit
异丹参酮II HPLC≥95% 20mg 兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA检测试剂盒Rabbitlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 96T/48T
紫丹参素C HPLC≥95% 20mg 牛血小板活化因子(PAF)试剂盒 Bovine platelet activating factor,PAF ELISA Kit
维采宁 HPLC≥95% 20mg 英文名称HumansP-selectinELISAKit人可溶性sP-选择素(sP-selectin)ELISAKit规格:96T/48T
氯化飞燕草素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg 等电聚焦蛋白电泳(IEF)10倍祛色溶液500毫升
氯化飞燕草素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatNuclearfactor-kappaB,NF-κBELISA试剂盒大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氯化飞燕草素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg 小鼠细胞色素P450家族成员3A4(CYP3A4)ELISA试剂盒 ,英文名: CYP3A4 ELISA Kit
氯化矢车菊素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg 兔环0酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒Rabbitcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit 96T/48T
氯化矮牵牛素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg 牛血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)试剂盒 Bovine Thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit
氯化矮牵牛素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg 英文名称HumansE-selectin[CD-62E]ELISAKit人可溶性E-选择素(sE-selectin[CD-62E])规格:96T/48T
亚细胞结构蛋白提取试剂盒水仙苷 HPLC≥98% 20mg HumanAi-OvaryAibody,AOAbELISA试剂盒人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
水仙环素 HPLC≥98% 1mg Humanai-parotidductaibodyELISA试剂盒人抗腮腺管抗体(ai-parotidductAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
水杨苷 HPLC≥98% 20mg HumanAi-phosphatidylserineaibody,APSAELISA试剂盒人抗0脂酰丝氨酸抗体(APSA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
水杨酸 HPLC≥98% 20mg Humanai-phospholipidaibody,Apl/APAELISAKit 人抗0脂抗体(Apl/APA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
水杨酸甲酯 HPLC≥98% 1ml Humanai-PL12-aibody,PL12/AlaRSELISA试剂盒人PL12抗体/抗氨酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
丝石竹皂苷元OBD葡萄糖醛酸甲酯 HPLC≥98% 20mg Humanai-presynapticmembraneaibody,PsmAbELISA试剂盒人抗突触膜抗体(PsmAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
斯皮诺素 HPLC≥98% 20mg Humanai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISA试剂盒人抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
四甲基姜黄素 HPLC≥98% 20mg Humanai-rabiesvirusaibody,ai-RVELISA试剂盒人抗狂犬病毒抗体(ai-RV)ELISA试剂盒规格:96T/48T
四氢表小檗碱 HPLC≥98% 20mg Humanai-Reticulinaibody,ARAELISAKit 人抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
四氢非洲防己碱 HPLC≥98% 20mg Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISA试剂盒人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)ELISA试剂盒规格:96T/48T
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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