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详细内容
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| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 磷酸化蛋白凝胶检测试剂盒 | Protein Stains S | 10 MINIGELS |
概述
在含Ca^2+离子的环境中,NaOH可将蛋白质中的磷酸基团水解成游离的PO3-离子,PO3-离子随即与Ca^2+离子反应形成不溶性的磷酸钙。磷酸钙在钼酸铵和硝酸作用下,形成不溶性的复合物,此复合物经甲基绿染色,形成绿色或蓝绿色的条带。本试剂盒是针对SDS-聚丙烯酰胺凝胶中磷酸化蛋白检测而设计的,无需经过Western Blot实验,且具有磷酸化蛋白特异性,可以从样品中特异性地检测出磷酸化蛋白。本试剂盒的检测灵敏度取决于目的蛋白质的磷酸化程度,可检测出50ng的酪蛋白。
应用
用于检测凝胶中的磷酸化蛋白
组份
溶液1;溶液2;溶液3;溶液4;溶液5;溶液6;溶液7
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
Myricadenin A 1612239-23-2 中文名: 分子式:C39H40O17 度:97.5% 关键词: 小鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISAKit
Mumeose K 2132384-01-9 中文名: 分子式:C25H32O15 度:93.0% 关键词: 小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISAKit
Monobenzone 103-16-2 中文名:莫诺苯宗 分子式:C13H12O2 度:98.0% 关键词: 小鼠细胞凋亡因子 (mouse Fas) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
Momor-cerebroside I 606125-07-9 中文名: 分子式:C48H93NO10 度:95.0% 关键词: 神经酰胺; 脑苷脂; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠细胞凋亡因子配体 (mouse Fas-Ligand) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
m-Nitrohydrocinnamic acid 1664-57-9 中文名: 分子式:C9H9NO4 度:98.0% 关键词: mouse Flt3 Ligand 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
异落新妇苷 HPLC≥95% 20mg HumanProteinSELISAKit 人蛋白S(ProteinS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
鹅掌楸碱 HPLC≥95% 20mg ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISA试剂盒鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
无根藤辛 HPLC≥95% 20mg 载玻片细胞P21蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
五脂素A HPLC≥98% 20mg Mousefreefattyacids,FFAELISAKit小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
苦木西碱J HPLC≥95% 20mg 小鼠晚期糖基化终末产物受体(AGER)ELISA试剂盒 ,英文名: AGER ELISA Kit
棕鳞矢车菊黄酮素 HPLC≥95% 20mg 兔钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA检测试剂盒RabbitLebtospiraIgGELISAKit 96T/48T
反式可母尼醇,湿地松醇 HPLC≥95% 20mg 牛神经肽Y(NPY)试剂盒 Bovine neuropeptide Y,NPY ELISA kit
灵芝酸S HPLC≥98% 20mg 英文名称HumahyroglobulinELISAKit人甲状腺球蛋白(TG)规格:96T/48T
灵芝萜酮二醇 HPLC≥98% 20mg 动物多酚氧化酶(polyphenoloxidase;PPO)活性比色法定量检测试剂盒20
(betaD吡喃葡萄糖氧基)水杨酸甲酯 HPLC≥95% 20mg RatPlateletFactor4,PF-4ELISA试剂盒大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
磷酸化蛋白凝胶检测试剂盒三(4,7-二苯基-1,10-菲绕啉酯)氯化钠钌(1mM 溶液) Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II) salt solution 质量规格:1mM,BC 小鼠血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)ELISA试剂盒 ,英文名: ANGPTL2 ELISA Kit
胰蛋白酶原 Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas 质量规格:BC 小鼠血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒 ,英文名: ANGPTL3 ELISA Kit
色胺(>98%,BR) Tryptamine 质量规格:>98%,BR 小鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒 ,英文名: ANGPTL4 ELISA Kit
三氧化钨(>99%,BC) Tungsten (VI) oxide 质量规格:>99%,BC 小鼠血管生成素样蛋白7(ANGPTL7)ELISA试剂盒 ,英文名: ANGPTL7 ELISA Kit
碳化钨200(>99%,BC) Tungsten carbide-200 质量规格:>99%,BC 小鼠血管生长素(ANG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
钨粉(200目)(>99.8%,BR) Tungsten powder 质量规格:>99.8%,BR 小鼠血管生长素(ANG)ELISA试剂盒 ,英文名: ANG ELISA Kit
钨酸(>98%,BC) Tungstic (VI) acid 质量规格:>98%,BC 小鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒 ,英文名: BK ELISA Kit
震颤真菌(>98%,BC) Verruculogen from Penicillium verruculosum 质量规格:>98%,BC 小鼠血管细胞粘附分子1(VCAM1)ELISA试剂盒 ,英文名: VCAM1 ELISA Kit
羊毛脂 Wool fat 质量规格:BR 小鼠血管性血友病因子(vWF)ELISA试剂盒 ,英文名: vWF ELISA Kit
5--4-氯-3-吲哚基-Β-D-葡萄糖醛酸钠盐 X-GLUC, salt 质量规格:>98%,分子生物学 小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA检测试剂盒MousevonWillebrandFactor,vWFELISAKit 96T/48T
热门标签:磷酸化蛋白凝胶检测试剂盒













