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酵母细胞蛋白裂解液
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详细内容
本产品利用表面活性剂和蛋白变性剂使样品快速充分破裂从而释放蛋白质,内含作用强烈的蛋白酶抑制剂,从而保证了蛋白质的完整性。适用于酵母天然总蛋白和重组的蛋白质的变性提取,提取的蛋白质可以用于SDS-PAGE,Western blot等实验。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 酵母细胞蛋白裂解液 | Yeast Total Protein Lysis Buffer | 10次 |
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期2年。
使用方法:
将过夜培养的酵母培养物大约1.5mL,8000rpm(5700g)离心1min。
按照每20mg湿重加溶液A 1mL、溶液B 10μL和溶液C 1μL。
在涡悬振荡器上振荡30sec,让菌体充分悬浮。
在室温下,放在脱色摇床上轻轻振荡30min。
转置冷冻离心机中,4℃,12000rpm(12830g)离心5min,取上清用于后续实验。
注意事项:
溶液A在-20℃的冰箱保存,如果产生沉淀,可以先水浴30℃加热5min,使其充分溶解。
充分裂解后溶液中已经看不到泥浆样悬浮颗粒存在,但是溶液还不是很透明。
在执行步骤4后,将试管放入冰箱或液氮中冻融一次,可以促进蛋白质的完全释放。
产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算,为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能,将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
使用后请旋紧瓶盖,防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
本试剂只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果,概不承担责任。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
Formestane 566-48-3 中文名:福美司坦 分子式:C19H26O3 度:98.0% 关键词: 小鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISAKit
Folic acid 59-30-3 中文名:叶酸 分子式:C19H19N7O6 度:98.0% 小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISAKit
Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine 175291-56-2 中文名:Fmoc-苏氨酸磷酸苄酯 分子式:C26H26NO8P 度:98.0% 关键词: 小鼠水通道蛋白elisa试剂盒 小鼠水通道蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠水通道蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠水通道蛋白试剂盒、小鼠水通道蛋白eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Fluoronaphthalene 321-38-0 中文名: 分子式:C10H7F 度:98.0% 小鼠抗胰蛋白酶elisa试剂盒 小鼠抗胰蛋白酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠抗胰蛋白酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠抗胰蛋白酶试剂盒、小鼠抗胰蛋白酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Fluorocytosine 2022-85⁻⁷ 中文名: 分子式:C4H4FN3O 度:98.0% 关键词: 小鼠己糖激酶elisa试剂盒 小鼠己糖激酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠己糖激酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠己糖激酶试剂盒、小鼠己糖激酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
盐酸甲氯芬酯(标准品) Meclofenoxate HCl 质量规格:含量测定 小鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RAES)ELISA试剂盒 ,英文名: RAES ELISA Kit
醋酸甲地孕酮 Megestrol Acetate 质量规格:>98%,BR,USP31 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA检测试剂盒GuineaPigSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 96T/48T
醋酸甲地孕酮(标准品) Megestrol Acetate 质量规格:HPLC>98%,标准品 牛葡萄糖60酸脱氢酶(G6PD)试剂盒 Bovine Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase,G6PD ELISA Kit
美拉诺坦II;MTII Melanotan ⅡAcetate 质量规格:>98%,BR 英文名称HumanMaixmetalloproteinase-10—MMP-10ELISAkit人基质金属蛋白酶10(MMP-10)规格:96T/48T
美洛昔康 Meloxicam 质量规格:>99% 动物全血线粒体粗提分离试剂盒10
美洛昔康(标准品) Meloxicam 质量规格:HPLC>98%,标准品 Ratprostatespecificaigen,PSAELISA试剂盒大鼠列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
盐酸美金刚胺 Memantine HCl 质量规格:>99% 小鼠天门冬酸基转移酶(AST)ELISA试剂盒 ,英文名: AST ELISA Kit
盐酸美金刚(标准品) Memantine 质量规格:含量测定 小鼠白介素17(IL-17)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin17,IL-17ELISAKit 96T/48T
甲氨蝶呤 Methotrexate 质量规格:>99%,BR 人骨形成蛋白4(BMP4)试剂盒 Human BMP4 ELISA Kit
甲氨蝶呤(标准品) Methotrexate 质量规格:HPLC>99%,标准品 RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKiatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA试剂盒规格:96T/48T
酵母细胞蛋白裂解液去甲黄腐醇 HPLC≥95% 20mg Ratcoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
异丹参酮II HPLC≥95% 20mg Ratcoicoopieleasinghormone,CRHELISA试剂盒大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
紫丹参素C HPLC≥95% 20mg ratCoicosterone,COELISAKit大鼠皮质同/肾上腺同(CO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
维采宁 HPLC≥95% 20mg ratCoicosterone,COELISA试剂盒大鼠皮质同/肾上腺同(CO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氯化飞燕草素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCoisolELISAKit大鼠皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氯化飞燕草素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCoisolELISA试剂盒大鼠皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氯化飞燕草素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollagenaseIELISAKit大鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氯化矢车菊素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollagenaseIELISA试剂盒大鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氯化矮牵牛素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollagenaseTypeIIELISAKit大鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氯化矮牵牛素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollagenaseTypeIIELISA试剂盒大鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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