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细菌细胞蛋白裂解液
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详细内容
储存条件:冷冻(-20℃)
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 细菌细胞蛋白裂解液 | Bacterial Lysis Buffer | 10次 |

概述
采用各种表面活性剂和蛋白变性剂,使样品快速充分破裂,从而释放蛋白质;内含作用强烈的蛋白酶抑制剂,从而保证了蛋白的完整性。适用于细菌天然总蛋白和重组的蛋白质的提取(包括可溶性和不溶性蛋白质的变性提取)。提取的蛋白质可以用于SDS-PAGE或者在低温下透析,以便尝试复性。为1倍的缓冲液,可以处理200mg湿重菌。
特点
提取效果好,提取的蛋白可直接用于后续实验。可以处理200mg湿重菌。
应用
提取的蛋白质可以用于SDS-PAGE或者在低温下透析,以便尝试复性。
使用说明
提取buffer中含SDS和蛋白酶抑制剂,提取的蛋白为变性蛋白
组份
溶液A,溶液B,溶液C
适用样本
细菌天然总蛋白和重组的蛋白质
Furosemide 54-31-9 中文名: 分子式:C12H11ClN2O5S 度:98.0% 小鼠廋素受体 英文名称: Leptin receptor 规格: 48T/96T 英文缩写: Leptin R
Furazolidone 67-45-8 中文名:唑酮 分子式:C8H7N3O5 度:98.0% 关键词: 小鼠促黄体生成激素 英文名称: leinizing hormone 规格: 48T/96T 英文缩写: LH
Fumaric acid 110-17-8 中文名: 分子式:C4H4O4 度:% 关键词: 抗牛皮癣; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠溶菌酶 英文名称: Lysozyme 规格: 48T/96T 英文缩写: Lysozyme
Fudosteine 13189-98-5 中文名:福多斯坦 分子式:C6H13NO3S 度:98.0% 关键词: 小鼠丝酸/苏酸蛋酸酶(STK)ELISAKit
Fosaprepitant dimeglumine 265121-04-8 中文名: 分子式:C30H40F7N6O10P 度:98.0% 小鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISAKit
盐酸洛美沙星 Lomefloxacin HCl 质量规格:>98.5%,BR 人骨形成蛋白6(BMP-6)试剂盒 Human BMP-6 ELISA Kit
盐酸洛美沙星(标准品) Lomefloxacin HCl 质量规格:含量测定 RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISAKit大鼠脂酰辅酶A合成酶(ACS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
氯替泼诺 Loteprednol Etabonate 质量规格:>99.0% 721型分光光度仪1毫升1厘米光径塑料比色皿1个
氯替泼诺(标准品) Loteprednol Etabonate 质量规格:HPLC>99.0%,标准品 Mouseglucocoicoidreceptor,GRELISA试剂盒小鼠糖皮质类受体(GR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
洛伐他汀 Lovastatin,Monacolin K 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养 小鼠铁蛋白(FE)ELISA 试剂盒
洛伐他汀(标准品) Lovastatin,Monacolin K 质量规格:HPLC>98%,标准品 Siated muscle actinin alpha (SM Actinin- a) ELISA Kit 大鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒
卢比列腺素/卢比列酮 Lubiprostone 质量规格:>99% Humanmannosereceptor,MRELISAKit 人甘露糖受体(MR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
赖氨酸加压素;赖氨加压素 Lypressin Acetate 质量规格:>98%,BR ChickenansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA试剂盒鸡转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
醋酸M肽 Matrixyl Acetate 质量规格:>95%脂溶性的 载玻片细胞RUNX3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
盐酸甲氯芬酯 Meclofenoxate HCl 质量规格:≥98%,BR MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细菌细胞蛋白裂解液去甲基雷诺嗪 Desmethyl Ranolazine 质量规格:美国进口 猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA检测试剂盒swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢELISAKit 96T/48T
雷诺嗪-d3 Ranolazine-d3 质量规格:美国进口 猪转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T
雷诺嗪 Ranolazine 质量规格:美国进口 猪组胺(HIS)ELISA检测试剂盒PorcineHistamine,HISELISAKit 96T/48T
去甲基雷诺嗪β-D-葡萄糖苷酸 Desmethyl Ranolazine β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口 总抗氧化能力(TAC)终点比色法定量检测试剂盒50
(R)-盐酸乐卡地平 (R)-Lercanidipine 质量规格:美国进口 组蛋白H2A-K5乙酰化检测试剂盒10/20等
(S)-盐酸乐卡地平 (S)-Lercanidipine 质量规格:美国进口 组蛋白H2A-K9乙酰化检测试剂盒10/20等
外消旋N-去甲基异丙嗪 rac N-Demethyl Promethazine 质量规格:美国进口 组蛋白H2A-T1200酸化检测试剂盒10/20等
异丙嗪亚砜 Promethazine Sulfoxide 质量规格:美国进口 组蛋白H2A-T1290酸化检测试剂盒10/20等
4-羟基雷美替胺 4-Hydroxy Ramelteon 质量规格:美国进口 组蛋白H2B-0乙酰化检测试剂盒10/20等
雷美替胺代谢产物M-II (羟基位点R型和S型混合物) Ramelteon Metabolite M-II (mixture of R and S at the hydroxy position) 质量规格:美国进口 组蛋白H2B-乙酰化检测试剂盒10/20等
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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