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一步法动物组织活性蛋白提取试剂盒
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| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 一步法动物组织活性蛋白提取试剂盒 | One Step Animal Tissue Active Protein Extraction Kit | 20次 |

概述
一步法动物组织活性蛋白提取试剂盒用于从动物组织中提取有活性的总蛋白,该试剂由一种温和的非离子型去污试剂、缓冲试剂和氯化钠等组成。采用匀浆或超声破碎时,该试剂高效提取的蛋白质可以大限度地保持活性,可以用于1D和2D电泳、免疫共沉淀、Pull down、EMSA、报告基因分析(Luciferase、β-galactosidase、Chloramphenicol Acetyltransferase等)、蛋白质激酶分析(PKA、PKC、Tyrosine Kinase等)、酶免分析(Western Blot、ELISA、RIA)、蛋白质纯化等实验,含有的去污试剂可通过透析去除。由抽提试剂、蛋白酶抑制剂混合物、DTT和PMSF组成。
特点
整个实验过程只需要20min左右;
可以处理20×100mg的动物组织样品;
提取的蛋白质可以透析去除离子和去污试剂,或将缓冲液替换为所需要的合适缓冲液;
提取的活性蛋白质保持非变性状态,可以直接用于1D和2D电泳、Pull Down、EMSA、免疫共沉淀、蛋白纯化、酶活分析等实验;
可以维持报告基因酶(Luciferase、β-galactosidase、Chloramphenicol Acetyltransferase等)、蛋白质激酶(PKA、PKC、Tyrosine Kinase等)的活性。
应用
可以用于1D和2D电泳、免疫共沉淀、Pull Down、EMSA、报告基因分析、蛋白质激酶分析、酶免分析等生化分析。
组份
抽提试剂;蛋白酶抑制剂;DTT;PMSF
适用样本
动物组织总蛋白提取
Fenticonazole nitrate 73151-29-8 中文名:硝酸芬替康唑 分子式:C24H21Cl2N3O4S 度:98.0% 关键词: 小鼠鼠总抗氧化能力(T-AOC)ELISA试剂盒
Fenofibric acid 42017-89-0 中文名:非诺贝特酸 分子式:C17H15ClO4 度:98.0% 关键词: 小鼠鼠病毒抗体(MPV-Ab)ELISA试剂盒
Fenbendazole 43210-67-9 中文名:芬苯达唑 分子式:C15H13N3O2S 度:98.0% 关键词: 小鼠鼠病毒(MPV)ELISA试剂盒
Fenazox 61618-27⁻⁷ 中文名:氨芬酸钠 分子式:C15H14NNaO4 度:98.0% 关键词: 小鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒
Felodipine 72509⁻⁷6-3 中文名:非洛地平 分子式:C18H19Cl2NO4 度:98.0% 关键词: 小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒
盐酸昂丹司琼 Ondansetron HCl 质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养 小鼠天冬酸转酶(AST)ELISA试剂盒 ,英文名: AST ELISA Kit
盐酸昂丹司琼(标准品) Ondansetron HCl 质量规格:HPLC>98%,标准品 豚鼠血清(NO)ELISA检测试剂盒guineapigniicoxide,NOELISAKit 96T/48T
奥硝唑 Ornidazole 质量规格:>99%,BR 牛内皮型合成酶(eNOS)试剂盒 Bovine Endothelial niic oxide syhase,eNOS ELISA Kit
奥硝唑(标准品) Ornidazole 质量规格:HPLC>99%,标准品 英文名称Human-TELISAKit人肌钙蛋白-T(Tn-T)规格:96T/48T
奥沙利铂 Oxaliplatin 质量规格:>99%,BR,细胞培养 动物软组织线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒20
奥沙利铂(标准品) Oxaliplatin 质量规格:HPLC>98%,标准品 RatP-SelectinELISA试剂盒大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒规格:96T/48T
硝酸奥昔康唑 Oxiconazole Nitrate 质量规格:度>99% 小鼠天冬酸基转移酶(AST)ELISA试剂盒 ,英文名: AST ELISA Kit
盐酸土霉素 Oxytetracycline HCl 质量规格:>95%,BR 小鼠白介素18(IL-18)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin18,IL-18ELISAKit 96T/48T
盐酸土霉素(标准品) Oxytetracycline HCl 质量规格:效价测定 人骨涎蛋白(BSP)试剂盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISA Kit
缩宫素,醋酸催产素 Oxytocin Acetate 质量规格:>97%,BR Ratferritin,FEELISAKit大鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
一步法动物组织活性蛋白提取试剂盒曲洛司坦(标准品) Trilostane 质量规格:HPLC>98%,标准品 Ratβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISA试剂盒大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
醋酸曲普瑞林 Triptorelin Acetate 质量规格:度大于98% Ratβ-Defensins,β-DFELISAKit大鼠β-防御素(β-DF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
盐酸万古霉素 Vancomycin HCl 质量规格:≥900μg/mg,USP33,BR Ratβ-Defensins,β-DFELISA试剂盒大鼠β-防御素(β-DF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
盐酸万古霉素(标准品) Vancomycin HCl 质量规格:含量测定 Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
凡德他尼 Vandetanib 质量规格:>99%,可用于细胞培养 Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISA试剂盒大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
伐伦克林 Varenicline Tartrate 质量规格:>98% Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit大鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒规格:96T/48T
伐伦克林(标准品) Varenicline Tartrate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISA试剂盒大鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒规格:96T/48T
长春瑞宾/重长春瑞宾 Vinorelbine Tartrate 质量规格:>98%,USP,BR Rayon, hemagglinin (FHA) ELISA Kit 人丝狀血球凝集素(FHA)ELISA试剂盒
重长春瑞宾(标准品) Vinorelbine Tartrate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋酸酶(STK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
伏立康唑 Voriconazole 质量规格:>99%,BR Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISA试剂盒大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋酸酶(STK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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