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详细内容
磷酸化蛋白富集试剂盒是利用磷酸基团与金属的亲和力,采用固定化金属螯合层析(IMAC)的方法富集磷酸化蛋白。可以选择性的对磷酸化蛋白和多肽进行富集和纯化。本试剂盒可以用来提取富集哺乳动物细胞、组织、细菌、酵母、植物等样本的的磷酸化蛋白。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 磷酸化蛋白富集试剂盒 | Phosphorylated protein enrichment Kit | 50T|100T |
经本试剂盒制备的蛋白样品可用于Western blotting,mass spectrometry,2D-PAGE和protein arrays等下游应用。
储存条件:蛋白酶磷酸酶抑制剂-20℃保存;其它2-8℃保存。蛋白柱室温避光保存。
有效期:一年。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱,冰盒
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
6-O-Feruloylglucose 中文名:6-O-阿魏酰葡萄糖 分子式:C16H20O9 度:97.5% 兔子甲状腺素(T4)ELISA试剂盒
Arillatose B 中文名: 分子式:C22H30O14 度:96.5% 兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISAKit
Catalponol methylthiomethyl ether 中文名: 分子式:C17H22O2S 度:97.5% 兔子球蛋白M(IgM)ELISAKit
Ethyl glucoside 中文名:乙基葡萄糖苷 分子式:C8H16O6 度:97.0% 兔子甲状腺素(T4)ELISAKit
3-Hydroxycatalponol 中文名: 分子式:C15H18O3 度:97.0% 兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit
N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺 Z-Gln-OH 质量规格:>98%,BR ELISAKitAChRab人乙酰胆碱受体抗体规格:48T/96T
N-CBZ-L-丙氨酸 CBZ-L-Gly 质量规格:>98%,BR 小鼠角化细胞生长因子(KGF/FGF⁻⁷)ELISA试剂盒 ,英文名: KGF/FGF⁻⁷ ELISA Kit
盐酸丙美卡因 Proparacaine HCl 质量规格:>98%,BR 大鼠髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISA检测试剂盒Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 96T/48T
N-苄氧羰基-L-丝氨酸 Z-Ser-OH 质量规格:>98.5%,BR 人促甲状腺素受体(TSHR)抗体试剂盒 Human TSHR aibody ELISA Kit
N-苄氧羰基-L-苏氨酸 Z-Thr-OH 质量规格:0.98 RatsolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联分析大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)酶联分析体(sEPCR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N-CBZ-beta-丙氨酸 Z-β-Ala-OH 质量规格:0.98 HSV(HERPESSIMPLX)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2
CBZ-D-谷氨酸α-苄酯 Z-Glu-OBzl 质量规格:>98% Mouseα-L-iduronidase,IDUAELISA试剂盒小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N-苄氧羰基-L-酪氨酸 Z-Tyr-OH 质量规格:0.98 小鼠角化细胞因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒 ,英文名: AR ELISA Kit
Z-L-酪氨酸甲酯 Z-Tyr-OMe 质量规格:>98%,BR 大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA检测试剂盒RatCyclin-D1ELISAKit 96T/48T
阿莫西林钠 Amoxicillin 质量规格:>90%,BR 人促甲状腺素受体(TSHR)试剂盒 Human TSHR ELISA Kit
磷酸化蛋白富集试剂盒番泻苷D HPLC≥98% 10mg DH10B电转感受态细菌5X100微升
番泻苷元A HPLC≥98% 20mg DH10B钙转感受态细菌5X200微升
番泻苷元B HPLC≥98% 20mg DH10B细菌1毫升
反式茴香脑 GC≥98% 20mg DH5α电转感受态细菌10X100微升
芳樟醇 HPLC(GC)≥98% 20mg DH5α钙转感受态细菌10X200微升
防己诺林碱 HPLC≥98% 20mg DH5α细菌1毫升
飞蓬苷 HPLC≥98% 20mg DHPR受体蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
飞蓬酯乙 HPLC≥98% 20mg DHPR受体蛋白表达检测试剂盒20
非洲防己碱 HPLC≥98% 20mg DHPR受体蛋白共沉淀分析试剂盒5
粉防己碱 HPLC≥98% 20mg DICER酶基因敲除试剂盒5
热门标签:磷酸化蛋白富集试剂盒













