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免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)
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详细内容
本品WB/IP裂解液,是一种非变性条件下的裂解液,可以有效维持原有的蛋白间的相互作用。其主要裂解成分为1%的Triton X-100,不含蛋白酶、磷酸酶等抑制剂,裂解得到的蛋白样品可用于Western、IP、CoIP以及许多兼容1%Triton X-100的酶活性或者生物小分子的检测。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂) | Lysis Buffer for WB/IP Assays (without enzyme inhibitors) | 100ml |
注意事项
1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂,使用请根据实验情况添加合适酶抑制剂或不加酶抑制剂。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3)如果WB/IP裂解液得到的蛋白样品是用于酶活性测试或一些生物小分子的检测,需要测试标准品用该裂解液稀释后是否会显著影响标准曲线,如无显著影响,则可继续使用。
4) 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
Olopatadine 140462⁻⁷6-6 中文名:盐酸奥洛他定 分子式:C21H24ClNO3 人脂蛋白脂酶(LPL)酶联吸附测定试剂盒 Human LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit
Tenofovir 147127-20-6 中文名:泰诺福韦 分子式:C9H14N5O4P 人脂多糖结合蛋白(LBP)酶联吸附测定试剂盒 Human LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit
Nafidil di 57149-08-3 中文名:盐酸萘哌地尔 分子式:C24H30Cl2N2O3 人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA试剂盒
Zileuton 111406-87-2 中文名:齐留通 分子式:C11H12N2O2S 人整合素αⅤβ3(IegrinαⅤβ3)ELISA试剂盒
Cefozopran 113981-44-5 中文名:盐酸头孢唑兰 分子式:C19H18ClN9O5S2 人真胰岛素(TI)ELISA试剂盒
安乃近(标准品) Analgin 质量规格:含量测定 Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
艾格列净;依帕列净;恩格列嗪 Empagliflozin; BI-10773 质量规格:>99%,SGLT-2抑制剂 P21蛋白表达西方杂交分析试剂盒5
BQ123 BQ-123 质量规格:>95%,BR PorcineIerleukin5,IL-5ELISA试剂盒猪白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒规格:96T/48T
泛影酸(标准品) diatrizoic acid 质量规格:鉴别 小鼠谷酰胺酶2(GLS2)ELISA试剂盒 ,英文名: GLS2 ELISA Kit
甘罗铵(标准品) Glycopyrrolate 质量规格:含量测定 人克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA检测试剂盒HumanClaracellprotein,CC16ELISAKit 96T/48T
磺胺(标准品) Sulfanilamide 质量规格:检查 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1)试剂盒 Rat Eotaxin 1,Eotaxin 1/CCL11/ECF ELISA Kit
磺胺嘧啶(标准品) Sulfadiazine 质量规格:含量测定 英文名称RatHeatShockProtein70ELISAKit大鼠热休克蛋白70(HSP70)规格:96T/48T
磺胺嘧啶 Sulfadiazine 质量规格:>99%,BR 活化凝血因子8(FACTORVIIIa)活性比色法定量检测试剂盒20
炔诺孕酮(标准品) Norgestrel 质量规格:含量测定 ELISAKitANKRD1人心肌锚蛋白重复域1规格:48T/96T
BML-275 HCl,物质C盐酸盐 Dorsomorphin 2HCl;BML275.HCL;Compound C 质量规格:>98%,AMPK选择性抑制剂 小鼠谷酰胺酶(GLS)ELISA试剂盒 ,英文名: GLS ELISA Kit
免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)阿德福韦/阿德福韦酯(标准品) Adefovir dipivoxil 质量规格:HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织ERBETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
R-盐酸普拉克索 R-Pramipexole Di Monohydrate 质量规格:度大于99%,R构型 冰冻切片组织ERK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
氯氮平 Clozapine 质量规格:>99% 冰冻切片组织FSH-BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
氯氮平(标准品) Clozapine 质量规格:HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织GSK-3ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
恩诺沙星 Enrofloxacin 质量规格:>98.5% 冰冻切片组织GSK-3BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
恩诺沙星(标准品) Enrofloxacin 质量规格:HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织HISTONEH3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
盐酸恩诺沙星 Enrofloxacin HCL 质量规格:>98.5% 冰冻切片组织IGF蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
盐酸恩诺沙星(标准品) Enrofloxacin HCL 质量规格:HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织IKB-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
佐米曲普坦 Zolmitriptan 质量规格:>99% 冰冻切片组织IL蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
胸腺肽alpha 1 Thymosin alpha 1 Acetate 质量规格:BR,进分 冰冻切片组织INSULI-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
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