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1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)
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详细内容
本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液(1×),裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂) | 1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors | 100ml |

注意事项
1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂,使用请根据实验情况添加合适酶抑制剂。
2)裂解样品的所有步骤均需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
Brinzolamide 138890-62⁻⁷ 中文名:布林佐胺 分子式:C12H21N3O5S3 人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒
Tetraethyl ranelate 58194-26-6 中文名: 分子式:C20H26N2O8S 人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISAKit
3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt 219921-94-5 中文名: 分子式:C23H37N3O5 人细胞色素P450c21B/21-羟化酶(CYP21B)ELISAKit
Sunitinib malate 341031-54⁻⁷ 中文名:苹果酸舒尼替尼 分子式:C26H33FN4O7 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISAKit
Butenafine 101827-46⁻⁷ 中文名:盐酸布替萘芬 分子式:C23H28ClN 人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISAKit
甲巯咪唑(标准品) Methimazole 质量规格:含量测定 人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA检测试剂盒HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 96T/48T
枸橼酸氯米芬(标准品) Clomiphene 质量规格:含量测定 大鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)试剂盒 Rat cyclophilin A,CyPA ELISA Kit
甲磺酸双氢毒碱(标准品) Dihydroergotoxine mesylate 质量规格:含量测定 英文名称Ratheatshockprotein60ELISAKit大鼠热休克蛋白60(Hsp60)规格:96T/48T
6-醛基异麦冬黄烷酮A(标准品) 6-Aldehydoisoophiopogona A 质量规格:HPLC≥98%,标准品 活化凝血因子8(FACTORVIIIa)活性荧光定量检测试剂盒20
氯普噻吨(标准品) Chlorprothixene 质量规格:检查 ELISAKitCMLC-1人心肌肌凝蛋白轻链1规格:48T/96T
氯普噻吨 Chlorprothixene 质量规格:>98%,BR 小鼠谷酰胺合成酶(GS)ELISA试剂盒 ,英文名: GS ELISA Kit
咪唑(标准品) Imidazole 质量规格:检查 人酶2(CA-2)ELISA检测试剂盒Humancarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit 96T/48T
瑞他帕林;瑞他莫林 Retapamulin 质量规格:>99%,BR 大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)试剂盒 Rat Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit
乳果糖(标准品) Lactulose 质量规格:含量测定 英文名称Ratheatshockprotein60ELISAKit大鼠热休克蛋白60(Hsp60)规格:96T/48T
酞丁安(标准品) FTIBAMZONE 质量规格:UV法含量测定 活化凝血因子9(FACTORIXa)活性比色法定量检测试剂盒20
1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂)阿巴卡韦5'-β-D-葡萄糖苷酸 Abacavir 5'-β-D-Glucuronide 质量规格:美国进口 载玻片细胞IKB-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
4-(三氟甲基)烟酰胺 4-(Trifluoromethyl)nicotinamide 质量规格:美国进口 载玻片细胞IL蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
1-甲基-烟酰胺化物 1-Methyl-nicotinamide Iodide 质量规格:美国进口 载玻片细胞IL蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
烟酰胺-2,4,5,6-d4 Nicotinamide-2,4,5,6-d4 质量规格:美国进口 载玻片细胞INSULI-ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
N-(羟甲基)烟酰胺 N-(Hydroxymethyl)nicotinamide 质量规格:美国进口 载玻片细胞INSULI-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
烟酰胺黄嘌呤二核苷酸钠盐 Nicotinamide hypoxanthine dinucleotide salt 质量规格:美国进口 载玻片细胞INSULIN蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
N-(1,3,4-Thiadiazolyl)烟酰胺 N-(1,3,4-Thiadiazolyl)nicotinamide 质量规格:美国进口 载玻片细胞IP3R受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
β-烟酰胺单核苷酸 β-Nicotinamide mononucleotide 质量规格:美国进口 载玻片细胞JNK/SAPK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
环丙孕酮 Cyproterone 质量规格:美国进口 载玻片细胞MAPK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
15β-羟基醋酸环丙孕酮 15β-Hydroxy Cyproterone Acetate 质量规格:美国进口 载玻片细胞MYC蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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