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BL21(DE3)感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:37
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)elisa检测试剂盒
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详细内容
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| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| BL21(DE3)感受态细胞 | BL21(DE3) Competent Cells | 5×100μl|10×100μl |
概述
BL21(DE3)Competent Cells，该菌株用于高效表达克隆于含有T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。该菌株适合表达非毒性蛋白。
特点
高效表达
应用
该菌株用于高效表达克隆于含有T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。该菌株适合表达非毒性蛋白。
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
异水飞蓟宾(分析标准品,≥98%)Isosilybin质量规格：分析标准品,≥98% 小鼠白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T ELISAKitCXCR3小鼠CXC趋化因子受体3规格：48T/96T
3,3’-二没食子酸酯茶黄素(分析标准品,≥98.0%(HPLC))Theaflavin 3,3′-digallate质量规格：分析标准品,≥98.0%(HPLC) 人分泌粒蛋白1(嗜铬粒蛋白B)(CHGB/SCG1)试剂盒 Human CHGB/SCG1 ELISA kit ChickenLeinizingHormone,LHELISAKit鸡促黄体激素(LH)ELISA试剂盒规格：96T/48T
对香豆酸;对羟基肉桂酸(标准品)p-Coumaric acid质量规格：HPLC≥98%，标准品 RatLactateDehydrogenase,LDHELISAKit大鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒规格：96T/48T 人基质裂解蛋白(MAT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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