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pBR322质粒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:37
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详细内容
储存条件：冷冻（-20℃）
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| pBR322质粒 | pBR322 DNA | 50μg |
概述
pBR322 DNA is a 4361 bp double-stranded closed circular medium copy plasmid DNA commonly used for cloning.
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
银标准溶液(100µg/mL,基体:1%HNO3)Silver standard质量规格：100µg/mL,基体:1%HNO3 犬心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)试剂盒 Canine hea fatty acid binding protein,h-FABP ELISA Kit 人心肌特异性肌钙蛋白T(c)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
钪标准溶液(1000µg/mL,基体：10%HCL)Scandium standard质量规格：1000µg/mL,基体：10%HCL 英文名称HumanHLA-1ELISAKit人组织相容性抗原(HLA-1)规格：96T/48T 猪糜蛋白酶试剂盒 Pig chymoypsin ELISA Kit
钐标准溶液(1000μg/ml)Samarium standard质量规格：1000μg/ml 超强化学封闭溶液10毫升 HumanprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 人Ⅲ型胶原氨基端肽(PⅢ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
锡标准溶液(1000μg/ml)Tin standard质量规格：1000μg/ml Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISA试剂盒大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T HumanMetallothionein,MTELISA试剂盒人金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA试剂盒 ，英文名： MUC2 ELISA Kit 50773-41-6重楼皂苷I规格 Polyphyllin I
小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA检测试剂盒MousePeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit 96T/48T 76296⁻⁷2-5重楼皂苷II厂家 Polyphyllin II
人相关抗原9(SPAG9)抗体试剂盒 Human sperm associated aigen 9 (SPAG9) aibody ELISA Kit 19057-60-4重楼皂苷III说明书 Polyphyllin III
RatandrogenELISAKit大鼠雄激素(androgen)ELISA试剂盒规格：96T/48T 76296⁻⁷5-8重楼皂苷VII品牌 Polyphyllin VII
载玻片细胞线粒体复合物III蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 55916-51-3重楼皂苷VI规格 Polyphyllin VI
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热门标签：pBR322质粒
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