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单细胞全基因组PCR扩增试剂盒
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详细内容
本试剂盒基于多重链置换扩增的Phi29 DNA聚合酶等温扩增体系,Phi29 DNA聚合酶是从Bacillus subtilisPhi29中克隆出的嗜温DNA聚合酶,利用基因重组技术,在中进行表达后经多次纯化分离而得。Phi29 DNA聚合酶具有很强的链置换活性,可实现对DNA复杂结构的解链与复制。同时具有高效的DNA合成能力,可连续合成多达70kb的DNA片段。Phi29 DNA聚合酶具有很强的3’→5’外切酶活性,保真度高于绝大多数高保真酶,因此Phi29 DNA聚合酶特别适合用于全基因

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 单细胞全基因组PCR扩增试剂盒 | Single Cell Whole Genome Amplification Ki | 10次 |
本试剂盒可以实现单个细胞或者少量样本的全基因组无差别扩增,一个反应可以达到40μg的全基因组DNA。低质量样品会影响DNA的终产量,如果以DNA样品为模板,需避免使用降解的DNA作为起始模板。
产品特点:
高覆盖度:经过扩增后可达到95%以上的覆盖度。
高均一度:无偏好扩增,可实现全基因组的均一扩增。
高保真:具有很强的校正功能,保真度高。
高灵敏:可实现从单个细胞样本的全基因组扩增。
保存:-20℃
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
泽泻醇B醋酸酯(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Alisol B 23-acetate 人血清总补体(CH50)ELISA检测试剂盒Human50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T Humangranulocytespecificainuclearaibody,GS-ANAELISA试剂盒人粒细胞特异性抗核抗体(GS-ANA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
獐牙菜苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Sweroside 大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)试剂盒 Rat A Disiegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit Humanlambdaimmunoglobulinlightchain,λ-IgLCELISAKit人球蛋白轻链lambda(λ-IgLC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
獐牙菜苦苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Swertiamarin 英文名称RatMGα1ELISAKit大鼠α1微球蛋白(MGα1)规格:96T/48T 大鼠载脂蛋白C-II(APOC2)ELISA试剂盒 ,英文名: APOC2 ELISA Kit
樟脑(标准品)质量规格:HPLC≥96%,标准品Camphor 咖啡环氨酸(cyclamate)含量薄层色谱法定性检测试剂盒20 人抗IgE受体抗体ELISA检测试剂盒Humanai-IgEreceptoraibodyELISAKit 96T/48T
人抗SSA/Ro抗体 试剂盒 Human ai-SSA/Ro aibody ELISA Kit 11028-00-5绞股蓝皂苷说明书 Stevenleaf
Rat15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒规格:96T/48T 130-95-0金鸡纳碱品牌 Quinine
载玻片细胞IP3R受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 485-35-8金雀花碱规格 Cytisine
Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA试剂盒鸡17羟皮质类(17-OHCS)ELISA试剂盒规格:96T/48T 94079-81-9金石蚕苷厂家 Poliumoside
小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)ELISA试剂盒 ,英文名: MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit 482-36-0金丝桃苷说明书 Hyperoside
单细胞全基因组PCR扩增试剂盒552-41-0丹皮酚品牌 Paeonol 猪血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒 Pig Angiotensin Conveing Enzyme,ACE ELISA Kit
551-15-5甘草苷品牌 Liquiritin 猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)试剂盒 Pig angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
551-08-6丁烯基苯酞品牌 n-Butylidenephthalide 猪血管活性肠肽(VIP)试剂盒 Pig Vasoactive Iestinal Peptide,VIP ELISA Kit
5508-58⁻⁷新穿心莲内酯规格 Neoandrographolide 猪旋毛虫IgG抗体试剂盒 Pig ichinella IgG aibody ELISA Kit
5508-58⁻⁷穿心莲内酯厂家 Andrographolide 猪胸腺肽β4(Thymosin β4)试剂盒 Pig Thymosin β4 ELISA Kit
热门标签:单细胞全基因组PCR扩增试剂盒













