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BL21(DE3)感受态细胞(pGro7分子伴侣)
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详细内容
外源蛋白质在中的表达常形成包涵体或发生蛋白酶降解。大多是由于所表达的蛋白未能正确折叠造成。分子伴侣协同作用,可以帮助外源蛋白正确折叠。不同外源蛋白需要的分子伴侣不同。百奥莱博提供5种表达常用分子伴侣的BL21(DE3)衍生菌株,适用于不同外源蛋白在中有效折叠。该系统适用于pET系列等依赖T7启动子的表达载体
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| BL21(DE3)感受态细胞(pGro7分子伴侣) | Chaperone competent cells pGro7/BL21(DE3) | 100μl×10 |

獐牙菜苷(标准品)Sweroside质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠组织蛋白酶D(CTSD)ELISA试剂盒 ,英文名: CTSD ELISA Kit 组织样品组织蛋白酶B(CATHEPSINB)活性比色法定量检测试剂盒20
獐牙菜苦苷(标准品)Swertiamarin质量规格:HPLC≥98%,标准品 绵羊白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒SheepIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T HumanHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit人热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒规格:96T/48T
樟脑(标准品)Camphor质量规格:HPLC≥96%,标准品 犬胰岛素受体β(ISR-β)试剂盒 Canine Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT 人血管紧张素(1⁻⁷)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
晕苯(>95.0%(GC))Coronene质量规格:>95.0%(GC) 英文名称Mouse8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT小鼠8-异列腺素F2α(8-ISOPGF2a)规格:96T/48T 猪热休克蛋白60,线粒体(HSPD1/Hsp-60)试剂盒 Pig 60 kDa heat shock protein,mitochondrial(HSPD1)ELISA kit
犬孕激素/孕酮(PROG)ELISA检测试剂盒CanineProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T 84687-43-4黄芪甲苷厂家 Astragaloside IV
犬维生素A(VA)试剂盒 Dog Vitamin A,VA ELISA Kit 84680⁻⁷5-1黄芪皂苷I说明书 Astragaloside I
英文名称HumanGlycoprotein96ELISAKit人肿瘤排斥性抗原gp96(gp96)ELISA试剂盒规格:96T/48T 84676-89-1黄芪皂苷II品牌 Astragaloside II
超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒50 84687-42-3黄芪皂苷Ⅲ规格 Astragaloside III
RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISA试剂盒大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒规格:96T/48T 17429-69-5黄芪总皂苷厂家 Astragaloside
BL21(DE3)感受态细胞(pGro7分子伴侣)572-30-5扁蓄苷品牌 Avicularin 猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)试剂盒 Porcine oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit
572-30-5扁蓄苷规格 Avicularin 猪氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)试剂盒 Pig peroxiredoxin 2,PRDX2 ELISA kit
57-22⁻⁷长春新碱规格 Vincristine 猪血小板衍生生长因子(PDGF)试剂盒 Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit
57-22⁻⁷长春新碱规格 Vincristine 猪血小板活化因子(PAF)试剂盒 Pig platelet activating factor,PAF ELISA Kit
568⁻⁷3-0丹参酮I规格 Tanshi I 猪血小板活化因子(PAF)ELISA检测试剂盒Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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