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异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
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详细内容
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌暴露IPTG,铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | IPTG(Isopropyl β-D- Thiogalacyranoside ) | 5g|100g |

CAS号:367-93-1
分子式:C9H18O5S
分子量:238.31
纯度:≥99.0%(TLC)
熔点:110~114℃
性状:白色结晶性粉末
溶解性:IPTG贮存液,先在8ml蒸馏水中溶解2g,定溶至10ml,用0.22um滤器过滤除菌,贮存于-20℃。
储存条件:2~8℃
长春质碱-d3质量规格:美国进口Catharanthine-d3 大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA检测试剂盒RatIerleukin1β,IL-1βELISAKit 96T/48T HumanHyaluronicacid,HAELISA试剂盒人透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
阿苯达唑砜质量规格:美国进口Albendazole Sulfone 人EB病毒早期抗原(EBEA)抗体(IgG)试剂盒 Human EBEA IgG ELISA kit Humanmalondialchehyche,MDAELISAKit人二(MDA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
培哚普利酰基-α-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Perindopril Acyl-α-D-glucuronide 英文名称MouseActi-vatedproteinCELISAKit小鼠活化蛋白C规格:96T/48T 大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 ,英文名: VEGF ELISA Kit
培哚普利酰基-β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Perindopril Acyl-β-D-glucuronide 冰冻切片色素(MELANIN)染色试剂盒50 人阿米巴(Amebiasis)ELISA检测试剂盒HumanAmebiasisELISAKit 96T/48T
载玻片细胞HISTONEH3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 480-18-2花旗松素说明书 Taxifolin
Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISA试剂盒人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒规格:96T/48T 6882-68-4槐定碱品牌 Sophoridine
小鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 ,英文名: TGFβ2 ELISA Kit 145572-44⁻⁷槐果碱规格 Sophocarpine
小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA检测试剂盒MouseThyroxineaibody,TAbELISAKit 96T/48T 152-95-4槐角苷厂家 Sophoricoside
人抗U1小核核糖核蛋白70kDa(SNP70)抗体试剂盒 Human ai U1 small nuclear ribonucleoprotein 70kDa(SNP70)aibody ELISA kit 84605-18-5环黄芪醇说明书 Cycloastragenol
异丙基-β-D-硫代半乳糖苷58479-68-8桔梗皂苷D规格 Platycodin D 猪胰高血糖素样肽2(GLP2)试剂盒 Pig glucagon like peptide 2,GLP2 ELISA kit
5843-65-2去甲乌药碱品牌 Higenamine 猪胰高血糖素样肽1(GLP1)试剂盒 Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit
58316-41-9柴胡皂苷B2说明书 Saikosaponin B2 猪胰高血糖素(GC)试剂盒 Pig Glucagon,GC ELISA Kit
578-86-9甘草素规格 Liquiritigenin 猪胰淀粉酶α2(PAMY α2)试剂盒 Pig Pancreatic Amylase α2,PAMY α2 ELISA Kit
57-87-4甾醇规格 Ergosterol 猪胰岛素原(PI)试剂盒 Pig Proinsulin,PI ELISA Kit
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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