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X-α-Gal
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详细内容
X-α-Gal是一种酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的显色底物,用于在培养基上直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。通过蓝白颜色筛选,快速和简便地识别阳性的蓝色克隆,无需费时的β-半乳糖苷酶报告基因检测。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| X-α-Gal |
| 25mg|100mg|250mg|500mg |
X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活,MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码分泌型的α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并终产生蓝色产物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培养基上显蓝色,即阳性的双杂交作用。

产品用途:
1) α-半乳糖苷酶的显色底物,形成蓝色沉淀。在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用,利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays;
2) 用于区分肠杆菌科内的不同菌种以及区分双歧杆菌和乳酸菌;
3) 在组织化学中用于酶活性的检测。
泽泻醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠心肌肌钙蛋白T(TN2)ELISA试剂盒 ,英文名: TN2 ELISA Kit
毡毛美洲茶素 HPLC≥98% 5mg 兔子骨胶原交联(Cr)ELISA检测试剂盒RabbitCrosslaps,CrELISAKit 96T/48T
粘毛黄芩素 III 四乙酸酯 HPLC≥98% 5mg 牛脂酰辅酶A脱氢酶试剂盒 Bovine acyl-Coenzyme A dehydrogenase ELISA kit
粘毛黄芩素III HPLC≥98% 5mg 英文名称HumanGelsolinELISAKit人凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
樟叶木防己碱 HPLC≥98% 5mg 蛋白样品沉淀法去内试剂盒20
柘树口山酮 A HPLC≥98% 5mg RatMotilin,MTLELISA试剂盒大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
栀子醛 HPLC≥98% 5mg 小鼠心肌肌钙蛋白I(TNNI3)ELISA试剂盒 ,英文名: TNNI3 ELISA Kit
珠子草素 HPLC≥98% 5mg 兔子组织因子(TF)ELISA检测试剂盒rabbitTissuefactor,TFELISAKit 96T/48T
梓苷,梓实糖苷 HPLC≥98% 5mg 牛脂酰辅酶A合成酶试剂盒 Bovine acyl-CoA syhase ELISA kit
梓木内酯 HPLC≥98% 5mg 英文名称HumanPlasminogenactivator,urokinasereceptorELISAKit人尿激酶型血浆酶原激活因子受体((PLAUR,uPAR))规格:96T/48T
人血清淀粉样蛋白A(SAA)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:SAA1, PIG4, SAA, TP53I4, Serum amyloid A1 Human SAA(Serum Amyloid A) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组SAA浓度
X-α-Gal人白介素1受体拮抗剂(IL-1ra/IL-1F3)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:IL1RN, DIRA, ICIL-1RA, IL-1RN, IL-1RA, IL-1ra3, IL1F3, IL1RA, IRAP, MVCD4 Human IL-1ra/IL-1F3(Interleukin 1 Receptor Antagonist) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组IL-1ra/IL-1F3浓度
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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