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7-AAD细胞活力染色液
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:23
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详细内容
本品为7-AAD的即用型染色液，可直接用于细胞染色，其大激发波长为546nm，大发射波长为647nm，可在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。若每次（含1×105个细胞）用量10μl，本品可供检测150次。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 7-AAD细胞活力染色液 | 7-AAD Viability Staining Solution | 150T |
7-Aminoactinomycin D，简称7-AAD，是一种核酸染料，与DNA结合后可发出强烈的荧光，其荧光特性与PI相似，可被488nm氩离子激光激发，但其发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的佳替代品，可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用，如FITC，PE等。
另外，7-AAD是一种非渗透性荧光染料。该染料不能透过活细胞的细胞膜，但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜并与其内的DNA结合，可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞，广泛用于流式细胞术检测。
注意事项
1）7-AAD为潜在致癌物质，操作时请穿戴手套、眼罩以及其他防护措施，以避免接触皮肤。
2）玻璃器皿上残留的去垢剂也会影响染色的效果，导致细胞存在或不存在都会出现强荧光。玻璃器皿的清洗应用去垢剂，然后用自来水冲洗数遍后，用去离子水或蒸馏水漂洗。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
【注】：7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行，且仅仅染色死细胞。
样品在完成其他染色后，取0.5ml细胞悬液（～1×105个细胞），加入约10μl 7-AAD细胞活力染色剂，根据其激发发射波长（Ex/Em=545nm/650nm）在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。
储存条件：4℃避光干燥
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产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
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