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柱式细菌总RNA抽提纯化试剂盒
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详细内容
储存条件:冷藏(2-8℃)
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 柱式细菌总RNA抽提纯化试剂盒 | Spin Column Bacteria Total RNA Purification Kit | 50次|100次 |
概述
该试剂盒对经典的异硫氰酸胍抽提RNA的方法进行了改良。采用溶菌酶与裂解液共同作用,迅速裂解细胞,释放出RNA的同时灭活RNase。RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列漂洗和离心等步骤进一步将蛋白等杂质去除,后用DEPC-treated ddH2O将RNA从硅基质膜上洗脱。操作简单,全过程可在40分钟之内完成。获得的RNA OD260/OD280一般为2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern Blot、斑点杂交等实验。

特点
1.操作简单快速,整个过程40分钟左右完成。
2.使用安全,操作过程中无需使用酚、等有毒试剂。
3.纯化柱吸附量大,稳定性好,重复性好
应用
RNA抽提
八连管光学盖1条/包Bis[4-(dimethylamino)phenyl]methane11双[4-(二甲氨基)苯基]甲烷
玻璃三角瓶 带扰流挡板2ml/0ml/00ml4,4'-Bis(chloromethyl)biphenyl1664,4'-双(氯甲基)
玻片镊子把2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid09722,2-二羟甲基丁酸
不锈钢酒精灯0ml3',6'-Bis(diethylamino)-(4-nitrophenyl)spiro[isoindole,9'-xanthene]-one2919993',6'-双(二乙氨基)-(4-基)螺[异吲哚,9'-氧杂蒽]-酮
不锈钢涂布棒1,3-Bis(4,5-dihydro-oxazolyl)benzene351,3-双(4,5-二氢-恶唑)苯
小鼠雌二醇(E2)ELISAKit Citreorosein 481⁻⁷3-2 中文名:ω-羟基大黄素 分子式:C15H10O6 度:97.0% 关键词: cAMP磷酸二酯酶抑制剂; ; 大黄属; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽elisa试剂盒 小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽试剂盒、小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 cis-Octahydro-isoindole 21850-12-4 中文名: 分子式:C8H15N 度:98.0% 关键词:
小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISAKit Nandrolone undecylate 中文名:十一酸诺龙 分子式:C29H46O3
小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISAKit Bisdemethoxycucurmin 中文名:双去甲氧基姜黄素 分子式:C19H16O4 度:98.0%
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA试剂盒 Citreorosein 中文名:ω-羟基大黄素 分子式:C15H10O6
柱式细菌总RNA抽提纯化试剂盒2-Benzoylbenzoic acid 85-52-9 中文名:2-苯甲酰苯甲酸 分子式:C14H10O3 度:98.0% 小鼠肌酸激酶(mouse CK) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate 95-30⁻⁷ 中文名:二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯 分子式:C12H14N2S3 度:98.0% 关键词: 小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
2-Benzothiazolol 934-34-9 中文名:2-羟基苯并噻唑 分子式:C7H5NOS 度:98.0% 关键词: 小鼠羟甲基赖酸(mouse CML) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
2-Aminothiazol-4-acetic acid 29676⁻⁷1-9 中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸 分子式:C5H6N2O2S 度:98.0% 关键词: 小鼠C-肽(mouse C-peptide) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
2-Aminophenyl phenyl sulfone 4273-98⁻⁷ 中文名:2-氨基二苯砜 分子式:C12H11NO2S 度:98.0% 小鼠肌红蛋白elisa试剂盒 小鼠肌红蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠肌红蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠肌红蛋白试剂盒、小鼠肌红蛋白eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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