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微量DNA柱式吸附清除试剂盒
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详细内容
任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,对于一些敏感的下游实验,需要去除微量的DNA残留,本试剂盒可直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 微量DNA柱式吸附清除试剂盒 |
| 50次 |
试剂盒特点:
简单快速,条件经过优化,一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA。
确保RNase free,可以保证RNA分子完整性。
兼容性广,可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒柱上消化,不需要提取到总RNA后再单独去除里面的残留DNA。
储存:DNase Buffer -20℃保存,去蛋白液RW1常温或者4℃保存,RNase free DNase-20℃保存,避免反复冻融。

注意事项:
DNase是非常敏感,易物理损坏变性丧失活性,所以不要漩涡混匀DNase I和工作液。轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。每次在抽提RNA抽提配置新鲜的工作液。DNase I buffer是和RNase-free DNase I配套门用于柱上消化,一般的10×DNase buffer并不能用于膜上的DNase消化,不能替代。
雌三醇残留酶联免疫检测试剂盒Dehydroadynerigenin glucosyldigitaloside14422
及残留酶联免疫检测试剂盒Dehydroadynerigenin digitaloside526282
倍他米松残留酶联免疫检测试剂盒Deflazacort144847地夫可特
西马特罗残留酶联免疫检测试剂盒Deferasirox151地拉罗司
β-呋喃果糖苷酶酶联免疫检测试剂盒Decoquinate1879癸氧喹酯
小鼠白介素-12 英文名称: ierleukin-12 规格: 48T/96T 英文缩写: IL-12 Cefotaxime 中文名:头孢噻肟钠 分子式:C16H17N5NaO7S2 度:98.0%
小鼠白介素11(IL-11)ELISAKit N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide 1871-89-2 中文名:N,N'-双(2-羟乙基)草酰胺 分子式:C6H12N2O4 度:98.0%
小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 Candesartan cilexetil 145040-37-5 中文名:坎地沙坦西来替昔酯 分子式:C33H34N6O6 度:98.0% 关键词:
小鼠白介素10(IL-10)ELISAKIT N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide 中文名:N,N'-双(2-羟乙基)草酰胺 分子式:C6H12N2O4
小鼠白介素-10 英文名称: ierleukin-10 规格: 48T/96T 英文缩写: IL-10 Cefozopran 113981-44-5 中文名:盐酸头孢唑兰 分子式:C19H18ClN9O5S2
微量DNA柱式吸附清除试剂盒1,2-O-Isopropylidene-β-D-frucyranose 66900-93-4 中文名: 分子式:C9H16O6 度:98.5% 关键词: 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISAKit
1,2-Cyclohexanedicarboximide 7506-66-3 中文名: 分子式:O2 度:98.0% 关键词: 小鼠谷胱甘肽巯基转移酶(GST)ELISA试剂盒
1,2-Bis(phenylthio)ethane 622-20-8 中文名:1,2-双(苯硫基)乙烷 分子式:C14H14S2 度:98.0% 关键词: 小鼠谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒
1,2-Bis(3-indenyl)ethane 18657-57-3 中文名:1,2-双(3-茚基)乙烷 分子式:C20H18 度:98.0% 关键词: 小鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒
1,2-Benzisothiazolin-3-one 2634-33-5 中文名:1,2-苯并异噻唑-3-酮 分子式:C7H5NOS 度:98.0% 关键词: 小鼠谷酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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