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细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:23
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详细内容
本试剂盒是在无苯酚、RNA快速提取技术基础上，又采用基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除，后低盐的RNase free H20将
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA) | Bacterial total RNA Extraction Kit | 50次 |
试剂盒特点：
1.完全不使用有毒的苯酚，等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留，可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。
注意事项：
1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C或者类似离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3.裂解液RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4.关于DNA的微量残留:
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留（DNase消化也无法做到100%无残留），本试剂盒提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术，绝大多数DNA已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1)选用跨内含子的引物，以穿过mRNA中的连接区，这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2)选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3)将RNA提取物用RNase-free的DNase I处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup)，请联系我们索取具体操作说明书。
4)在步骤去蛋白液RW1漂洗，直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联系我们索取具体操作说明书。
5.RNA纯度及浓度检测:
完整性：RNA可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE电泳缓冲液；150v，15分钟)检测完整性。由于细胞中70%～80%的RNA为rRNA，电泳后UV下应能看到非常明显的rRNA条带。动物rRNA大小分别约为5kb和2kb，分别相当于28S和18S rRNA。动物RNA样品中大rRNA亮度应为次大rRNA亮度的1.5～2.0倍，否则表示RNA样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度：OD260/OD280比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280读数（10mMTris,pH7.5）在1.8～2.1之间。OD260/OD280读数受测定所用溶液的pH值影响。同一个RNA样品，假定在10mM Tris，pH7.5溶液中测出的OD260/OD280读数1.8～2.1之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5～1.9之间，但这并不表示RNA不纯。
浓度：取一定量的RNA提取物，用RNase-free水稀释n倍，用RNase-free水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260,OD280测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40
储存条件：室温，有效期6个月
本制品别名：细菌RNA快速提取试剂盒|快速提取细菌RNA试剂盒
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
高分子量非变性电泳蛋白质Marker（6669 kD） 次 5-Benzimidazolecarboxylic acid1578865-苯并咪唑甲酸
碱性蛋白非变性电泳蛋白Marker 次 5-Azacytidine375-氮胞苷
宽分子量蛋白Marker（00KD） 次 5-Androstenβ-ol7-one ethyleneketal774
三色预染宽分子量蛋白质Marker（kD） 次/0元/2×次/0元/×次 5-Aminouracil93225-氨基尿嘧啶
双色预染宽分子量蛋白Marker（KD） 次 5-Aminosalicylic acid8975-氨基水杨酸
小鼠C-肽 英文名称： C-peptide 规格： 48T/96T 英文缩写： C-peptide Benzoyl leuco methylene blue 1249-97-4 中文名：苄酰基无色亚甲基兰 分子式：C23H23N3OS 度：98.0%
小鼠C-反应蛋白elisa试剂盒 小鼠C-反应蛋白试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠C-反应蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠C-反应蛋白试剂盒、小鼠C-反应蛋白eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Benzotetramisole 885051-07-0 中文名：苯并四咪唑 分子式：C15H12N2S 度：98.0% 关键词：
小鼠C反应蛋白(mouse CRP) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 Marsdenoside F 中文名： 分子式：C39H60O14
小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 Benzoyl leuco methylene blue 中文名：苄酰基无色亚甲基兰 分子式：C23H23N3OS
小鼠C反应蛋白 英文名称： C-reactive protein 规格： 48T/96T 英文缩写： CRP Benzopinacol 464⁻⁷2-2 中文名：苯频哪醇 分子式：C26H22O2 度：98.0% 关键词：
细菌RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA)3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 中文名：3-氨基-4-羟基苯甲酸 分子式：C7H7NO3 度：98.0% 小鼠MCP-3(mouse MCP-3) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装
1-Amino-4-hydroxyanthraqui 中文名：1-氨基-4-羟基蒽醌 分子式：C14H9NO3 度：98.0% 小鼠促黄体激素elisa试剂盒 小鼠促黄体激素试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠促黄体激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠促黄体激素试剂盒、小鼠促黄体激素eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
2-Amino-3-hydroxyanthraqui 中文名：2-氨基-3-羟基蒽醌 分子式：C14H9NO3 度：98.0% 小鼠雌三醇elisa试剂盒 小鼠雌三醇试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠雌三醇试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠雌三醇试剂盒、小鼠雌三醇eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid 中文名：6-氨基-4-羟基-2-萘磺酸 分子式：C10H9NO4S 度：98.0% 小鼠雌激素elisa试剂盒 小鼠雌激素试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠雌激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠雌激素试剂盒、小鼠雌激素eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid 中文名：4-氨基-3-羟基-1-萘磺酸 分子式：C10H9NO4S 度：98.0% 小鼠雌二醇受体elisa试剂盒 小鼠雌二醇受体试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠雌二醇受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠雌二醇受体试剂盒、小鼠雌二醇受体eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
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