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小鼠睾丸间质细胞瘤细胞MLTC-1
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详细内容
| 细胞名称 | MLTC-1小鼠睾丸间质细胞瘤细胞 |
| 种属 | 大鼠 |
| 组织来源 | 外周血;化学诱变嗜碱性细胞;白血病 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 背景描述 | RBL-2H3细胞是1978年国立牙科研究所的免疫学实验室从Wistar大鼠保持肿瘤状态的嗜碱性细胞中分离和克隆出来的嗜碱性白血病细胞株。RBL-2H3细胞具有高亲和力的IgE受体,通过集聚这些受体或与钙离子载体协同作用可以激活它们分泌组胺及其他递质。RBL-2H3细胞广泛地用于研究肥大细胞FcERI和分泌的生化途径。RBL-2H3细胞是研究FcERI结构的模型。它们广泛地用于研究细胞分泌的不同方面,包括细胞内钙浓度改变、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。虽然几乎所有批号的FBS都支持细胞的生长,但在某些批号中FcERI集聚后脱粒化得更好。另一株大鼠嗜碱性细胞株(RBL)不会脱粒化。 |
| 生长培养基 | MEM(货号:PM150410)+15% heat-inactivated FBS+1% P/S(货号:PB180120) |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |

1、您收到MLTC-1小鼠睾丸间质细胞瘤细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,*后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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