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优球蛋白溶解时间(ELT)检测试剂盒(加钙法)YS0351
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详细内容
浆经稀释后,加入弱酸是pH下降至4.5时,优球蛋白组成会沉淀下来,经离心后可去除纤溶抑制物,沉淀的的优球蛋白组分中含有纤维蛋白原、纤溶酶原以及纤溶酶原激活物等,将上述沉淀物溶解于缓冲液后,加入氯化钙使其凝固,置于37C观察凝块完全溶解所需时间。
雅吉生物优球蛋白溶解时间(ELT)检测试剂盒(加钙法)主要用于观察纤溶系统总的活性,是纤溶系统活性的筛选实验。
该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考)∶
1、制备待检血浆︰取新鲜待测静脉血2ml,与柠檬酸钠抗凝剂(109mM)按9:1混合,轻轻混匀,3000g 离心10min,收集上层液(缺乏血小板的血浆),转移至塑料试管或离心管;同时应设正常对照血浆。
2、取尖底离心管,加入7.5ml蒸馏水和0.12ml Acidic Buffer,混匀,置于冰水浴。
3、取0.5ml血浆加至冰浴中的离心管,混匀,继续冰浴10min,使优球蛋白充分析出。
4、3000g离心5min,弃上清,倒置离心管于滤纸上,吸去残余液体。
5、取0.5ml硼酸盐缓冲液加至沉淀,置于37C水浴,轻轻搅拌使之完全溶解。6、加入0.5mlCaClz溶液,立刻计时。
7、置于37℃水浴中,观察凝血块完全溶解,并记录时间。
参考区间:溶解时间一般大于120min,如果小于90min为异常。

自备材料:
1、蒸馏水
2、比色杯或 96 孔板
3、分光光度计或酶标仪
优球蛋白溶解时间(ELT)检测试剂盒(加钙法)操作步骤(仅供参考):
1、用蒸馏水稀释 Alkaline Buffer(10×)至 1×,密闭保存,待用。
2、准确称取亚硫酸盐若干份,每 1 份为 20mg,待用。
3、取大试管若干支,各加新鲜血液 0.1ml,另取一不吸烟的健康人血液 0.1ml 作为对照,分别加入 1×Alkaline Buffer 20ml,混匀。
4、立即分别加入亚硫酸盐 20mg,混匀。
5、取比色杯或 96 孔板加入恰当的上述血液,分别分光光度计或酶标仪测定 538nm 处吸光度(即为A538)和 578nm 处吸光度(即为 A578),注意应在 10min 内检测完毕。
计算结果: HbCO(%)={2.44×(A538/A578)-2.68}×100%
参考区间: 正常人:0.2%~0.5%城市居民可达 0.5%~1.5%
注意事项:
1、 每次检查应设正常对照。
2、 Alkaline Buffer 不要被酸碱污染,同时注意密闭保存。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6 个月有效。
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