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技术文章
你了解细胞凋亡及其检测的要点吗？
点击次数：3363 发布时间：2022/7/5 9:22:25
细胞凋亡（apoptosis）：属于细胞程序性死亡（Programmed Cell Death，PCD），是由基因控制的细胞自主、有序的死亡，在维持生物体内环境稳定方面发挥着重要作用。蝌蚪发育成青蛙的过程中，尾的消失就是生物学中典型的细胞凋亡现象。
死亡类型，而且具有重要的生物学意义及复杂的分子机制。细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段：接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化（Caspase）→进入连续反应过程。
细 胞 凋 亡 典 型 特 征
从形态学角度观察细胞凋亡，其过程是多阶段的，先是细胞体积缩小，连接消失，与周围的细胞脱离；然后是细胞质密度增加，线粒体膜电位消失，通透性改变，释放细胞色素C到胞浆；核质浓缩，核膜核仁破碎；胞膜有小泡状形成，膜内侧磷脂酰丝氨酸翻到膜外表面；Caspase活化，DNA降解成为约180bp-200bp片段；终可将凋亡细胞遗骸分割包裹为几个凋亡小体，无内容物外溢，因此不引起周围的炎症反应。凋亡小体可迅速被周围职或非职吞噬细胞吞噬。
细胞凋亡与疾病的关系
对于人而言，健康状况下，机体内细胞凋亡处于一个平衡状态。当细胞凋亡出现异常，就易引发各种疾病。
| 凋亡 过多 | 心血管疾病 | 心肌缺血、心力衰竭、再灌注损伤等 |
| 血液疾病 | 再生障碍性贫血等 | |
| 神经疾病 | 阿尔兹海默病、帕金森综合征等 | |
| 凋亡 不足 | 癌症 | 肝癌、肺癌、乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌等 |
| 自身免疫病 | 系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性甲状腺疾病等 |
Annexin V检测凋亡七大要点
1．接种——对数生长
细胞密度通常不超过1×106/ml，以免引起凋亡。
2. 收集——上清及铁壁细胞全部收集
部分凋亡细胞可能悬浮于培养上清中，须先收集上清，离心收集沉淀，再消化收集贴壁细胞，合并上清和消化下来的细胞。
3. 消化——选用Accutase酶
选用Accutase酶替代普通胰酶。Accutase酶已经在多种细胞系中得到验证，其消化更温和，可有效避免因消化过度使细胞膜的磷脂酰丝氨酸外翻，造成假阳性。（对凋亡不明显的实验强烈推荐）
4. 补偿调节——阳性质控
没有明显的凋亡，该如何调节补偿以及设门？联科生物凋亡试剂盒配备阳性质控液，补偿调节so easy！
5. 电压——足够大
大到快要超出边界。
6. 补偿——横平竖直
3、4象限横平；2、4象限竖直。
7. 漂亮结果——黄金分割（三分原则）
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
