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技术文章
类胡萝卜素(carotenoid)含量试剂盒
点击次数：3364 发布时间：2022/4/21 8:55:56
分光光度法50管/48样 注 意 ：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： 类胡萝卜素是一种脂溶性且具有营养特性的化合物，给植物和动物提供天然色素，是重要的抗氧化剂，并有能力转换为必需维生素。类胡萝卜素可预防细胞，组织和基因损毁，增强身体免疫系统，抵御感染，减少癌症风险，保护心脏。 测定原理： 自备实验用品及仪器： 天平、烘箱，100目筛、三角瓶或烧杯、漏斗，纱布、玻璃试管、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、正己烷 试剂组成和配制： 试剂一：液体100mL×3瓶，4℃保存。 试剂二：液体100mL×1瓶。4℃保存。 试剂三：液体80mL×1瓶。4℃保存。 试剂四：自备。（正己烷） 样本处理： 提取：称取0.5g样本，加入1.5mL试剂一 ，冰浴匀浆，超声破萃取15min(可改用振荡金属浴），15000g 25℃离心5min，取上层液转入10mL离心管中，沉淀用1.5mL试剂一重复提取2次，并将上层液并入上述10mL离心管中作为提取出的非皂化类胡萝卜素样品。 皂化：向上述非皂化类胡萝卜素样品中加入2mL试剂二，混匀，25℃室温避光皂化过夜，皂化完成后，加入3mL试剂三，混匀后，5000g 25℃离心5min，将上层类胡萝卜素提取相转入5mL离心管，用正己烷定容到5mL，置冰上待测。 测定操作表： 空白管 测定管 样本（μL） 1000 正己烷（μL） 1000 于1mL玻璃比色皿，迅速测定450nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管 注意：空白管只需测定一次。 计算公式： 类胡萝卜素含量（μg/g鲜重）= △A×V样总÷（ε×d）÷W = 31.25×△A÷W V样总：提取液总体积，5mL；ε：类胡萝卜素消光系数，0.16；d：比色皿光径，1cm； W：样本质量，g 注意事项： 1. 提取液易挥发，有毒性，操作时做好防护措施。 2. 测定必须能迅速，防止挥发造成误差。
样品通过混合有机溶剂萃取，类胡萝卜素与非类胡萝卜素成分分离，在448nm处有特征吸收峰。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
