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技术文章
植物叶绿素（chlorophyll）含量试剂盒
点击次数：3410 发布时间：2022/3/28 8:57:12
微量法100T/96S 注 意：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： 植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中，其含量与光合作用、营养状况密切相关，是反应植物生长状况的重要指标。 测定原理： 叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有大吸收，根据经验公式可计算得叶绿素a和叶绿素b以及总叶绿素含量。 自备实验用品及仪器： 天平、研钵、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、10mL玻璃试管、锡箔纸、丙酮。 试剂组成和配制： 试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。 测定操作： 1. 称取约新鲜植物叶片或其它绿色组织，去掉中脉，称取约0.1g，剪碎，用蒸馏水洗干净。 2. 提取液的准备：取240mL蒸馏水和960mL丙酮，充分混匀待用。 3. 加入1mL蒸馏水，少量试剂一（约50mg），在黑暗或弱光条件下充分研磨，转入10mL玻璃试管。 4. 用提取液冲洗研钵，将所有冲洗液转入玻璃试管，用提取液补充至10mL，玻璃试管置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h，观察试管底部组织残渣全变白则提取全，若组织残渣未全变白，继续浸提至其全变白。 5. 取浸提液200μL于微量石英比色皿/96孔板，提取液调零，测定663nm和645nm处吸光值，分别记为A663和A645 。 计算公式： 叶绿素a含量（mg/g 鲜重）=（12.7× A663 – 2.69 × A645）×V提×D÷m÷1000 = 0.01×（12.7× A663 – 2.69 × A645）×D÷m 叶绿素b含量（mg/g 鲜重）=（22.9× A645 – 4.68 × A663）×V提×D÷m÷1000 = 0.01×（22.9× A645 – 4.68 × A663）×D÷m 叶绿素总含量（mg/g 鲜重）=（20.21× A645 +8.02 × A663）×V提×D÷m÷1000 = 0.01×（20.21× A645 +8.02 × A663）×D÷m V提：提取液体积，10mL；D：稀释倍数；m：样本质量，g 注意事项： 1. 叶绿素对光敏感，研磨和提取等操作尽量避光或者在弱光下进行。 2. 一定要浸提至组织残渣全变白，否则提取不充分。 3. 用提取液冲洗研钵一定要冲洗至所有的绿色物质被转移至玻璃试管。 4. 测定时吸光值超过1，可进行适当稀释。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
