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技术文章

用好染色液,做好实验

点击次数:3474 发布时间:2022/1/17 10:02:59

在生物实验中,为了能够清楚地观察到目标蛋白、组织或细胞,通常会采用染色的方式进行直观验证。面对形态各异的组织和细胞,科研工作者会用多种多样的染色方法佐证自己的实验结果。选择了适当的染色液,就更容易观察到预期的实验现象或结果。



C02-04002 DAPI 染色液(即用型)

DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚,是能与 DNA 强力结合的荧光染料,常用于荧光显微镜及共聚焦观测。DAPI 可以透过完整的细胞膜,用于活细胞和固定细胞的染色。

DAPI 可以穿透细胞膜,与细胞核中的双链 DNA 结合而发挥标记的作用,可以产生比 DAPI 自身强 20 多倍的荧光。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞,荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %),且对活细胞无毒副作用。DAPI 染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI 也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链 DNA 染色。细胞经热激处理后用 DAPI 染色 3 分钟,在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。

人口腔鳞状细胞,DAPI (C02-04002) 染色

C-0010 DAB显色试剂盒 (20×)

DAB,即3,3'-二氨基联苯胺 (3,3'-diaminobenzidine),是辣根过氧化物酶的常用生色底物,在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化,形成浅棕色不溶性产物,用于检测过氧化物酶的活性。

本试剂盒灵敏度高,特异性好,可以用于在免疫组化或原位杂交时结合有辣根过氧化物酶的细胞或组织显色,也可以用于 Western blot 中结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。

大鼠脑组织,DAB (C-0010) 染色

C02-04004 苏木素-伊红染色试剂盒

组织学和病理学标本的染色方法很多,但基本的染色方法是苏木精-伊红染色。该方法可将细胞核染成蓝紫色,细胞质染成粉红色,使细胞结构对比分明。

苏木精 (Hematoxylin) 是从热带植物苏木中提取的一种色素,苏木精不能直接染色,必须暴露在空气中变成氧化苏木精(又叫苏木素)——“成熟”后才能使用。苏木精的“成熟”需时较长,配制后时间愈久,染色力愈强。苏木素中带正电荷的色精可吸附在细胞核中带负电荷的核酸成份上而将细胞核染成蓝紫色。伊红是带负电荷的酸性染料,使细胞浆呈现粉红色或红色。

苏木素-伊红染色试剂盒 (Hematoxylin-Eosin Staining Kit) 可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色,或与免疫组织化学、免疫细胞化学、免疫荧光、原位杂交等配合使用,步骤简便,操作时间短。使用苏木素-伊红染色试剂盒染色后,也可以进行免疫染色或其它染料的复染。染色后的细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。

此染色液可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液。

小鼠肾组织,苏木素-伊红染色试剂盒 (C02-04004) 染色

C05-04002 10×丽春红染色液

丽春红 (Ponceau S) 带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,也可以与蛋白的非性区相结合,从而形成红色的条带,因此常用于 PVDF 膜、硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜上的蛋白

原创作者:上海雅吉生物科技有限公司

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