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技术文章
铜蓝蛋白（CP）检测试剂盒（胺比色法）说明书
点击次数：3696 发布时间：2021/6/8 8:57:31
产品简介：
铜蓝蛋白(Ceruloplasmin，CP)又称为亚铁氧化酶或铜蓝蛋白氧化酶，是存在于肝脏、肾脏、血清等中的α2-糖蛋白，每个CP分子含有6~8个铜原子，其中Cu2+和Cu1+各占一半，故呈蓝色。CP具有铁氧化还原酶活性，能使Fe2+氧化为Fe3+，CP酶活性并非一，可与Fe2+、联苯胺、二甲基二苯胺、联大茴香胺等底物反应，可据此检测CP活性。
铜蓝蛋白(CP)检测试剂盒(胺比色法)其检测原理是铜蓝蛋白在弱酸条件下CP催化胺底物，生成淡棕黄色产物，终止反应后生成紫红色溶液，通过分光光度计或酶标仪检测540nm处吸光度，根据公式可计算出CP活性。该试剂盒主要用于检测血清、血浆等样品中的铜蓝蛋白，50T可检测23~24个样品。该试剂盒仅用于科研域，不宜用于临床诊断或其他用途。
HE染色过程：
❶将已入蒸馏水后的切片放入苏木 精水溶液中染色数分钟。
❷酸水及氨水中分色，各数钟。
❸流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。
❹入70％和90％酒精中脱水各10分钟。
❺入酒精伊红染色液染色2—3分钟。
❻染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。
❼将已透明的切片滴上树胶，盖上盖玻片封固。
HE染色常见的问题及解决方法
问题1 切片呈雾状/发灰/发白，核染色模糊
原因：①待封还潮；②苏木素过氧化老化，冰醋酸挥发；③脱水，透明剂不良，杂质过多；
解决方法：①空气除湿；②苏木素过滤后加入冰醋酸（促染剂）；③常规更换酒精，二甲苯。
问题2 细胞成分蓝色，如粘液，胶原蛋白或平滑肌
原因：①苏木素溶液过染；②分化不充分；③苏木素溶液的PH值＞3；
解决方法：①缩短染色时间；②用1%盐酸酒精分化2-5s，洗脱过染胞核，不应着色的组织成分；③用乙酸调节苏木素PH值为2.5；④提高酸性酒精的浓度。
问题3 细胞核染色太浅
原因：①苏木素溶液过老化；②分化时间过长；③苏木素溶液染色时间短；④固定处理不良，组织不易染色；解决方法：①过滤后100ml苏木素+1ml冰醋酸，或更换新鲜苏木素溶液；②减少分化时间或稀释分化液；③延长苏木素染色时间；④高浓度酒精固定时间过长，染不上色，用2%铁明矾处理。
问题4 胞质染色太淡
原因：①伊红染液使用时间太久；②伊红染液的PH值＞4.5，乙醇脱水易褪色；③伊红染液后酒精冲洗不正确；④伊红染色时间太短；
解决方法：①更换新鲜的伊红染液；②用浓醋酸调节伊红染液PH值（4~4.5），伊红PH值＜3.6，核发紫，对比不强；伊红染液PH值＞5，染不上；③减少伊红步骤后酒精冲洗的时间；④增加伊红溶液的染色时间。
问题5 细胞核发红棕色
原因：①苏木素染色液氧化过度；②返蓝不足；
解决方法：①及时更换然染液；②返蓝可用流水、温水或稀氨水、0.2%碳酸氢钠等。
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原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
