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技术文章
TIANSeq mRNA捕获试剂盒
点击次数：3659 发布时间：2021/5/27 9:53:24
产品简介
该试剂盒对于完整的总RNA均具有良好的mRNA捕获效果，所获得的mRNA可用于高通量测序，可显著提高测序结果中数据比例。此外，纯化的mRNA也可用于随机引物cDNA合成或其它下游应用。
产品特点
样本广泛：适用于高质量（完整）样本中mRNA的捕获，建议RNA 的RIN> 7。
数据：保留了完整的mRNA信息，提高转录组数据的性。
适用范围广：适用于100 ng-1 μg的RNA的捕获。
储存条件
4℃保存，保质期为一年
实验例
表1. 使用TIANSeq mRNA捕获试剂盒（NR105）捕获起始量为500 ng的人、小鼠和水稻总RNA中的mRNA，后续使用TIANSeq快速 RNA文库构建试剂盒（NR102）进行建库测序所得数据分析表明，三类样本的rRNA残留量低于2%，整体测序数据质量好。
操作步骤
1．处理磁珠：将mRNA捕获磁珠从4℃冰箱取出，室温平衡5 min，期间涡旋混匀，吸取10
μl mRNA捕获磁珠于200 μl Nuclease-Free PCR管中，置于在磁力架上1 min，待溶液澄
清后，小心吸弃上清。将EP管从磁力架上取出，加入50 μl磁珠结合缓冲液TM，反复吸
吹6次洗涤磁珠，之后放置在磁力架上1 min，待溶液澄清后，小心吸弃上清，重复洗涤
步骤一次，将磁珠重悬于50 μl 磁珠结合缓冲液TM中，室温放置备用。
2．在200 μl Nuclease-Free PCR管中，用Nuclease -Free ddH2O将100~1000 ng总RNA稀
释至50 μl，冰上放置备用。
注意：总RNA样品中应无DNA、盐离子（例如Mg2+、胍盐）、有机试剂（例如酚、乙
醇）残留，否则可能导致非预期的RNA降解或mRNA捕获效率降低。
3．参照下表配制mRNA捕获反应体系：
组分名称 体积
处理后的mRNA捕获磁珠 50 μl
总RNA 50 μl
Total 100 μl
4．将步骤3的mRNA捕获磁珠与RNA反应液用移液器吸吹混匀6次。
5．将步骤4的反应液置于PCR仪中（启用热盖99~105℃均可），按以下程序操作，总共耗
时约10 min。
步骤 温度 时间
1 65℃ 2 min
2 20 ℃ 5 min
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
