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技术文章
中量血液基因组DNA提取试剂盒
点击次数：3650 发布时间：2021/5/26 9:06:52
产品简介：
本试剂盒为特别针对0.5-3 ml血液样本开发的dyDNA提取试剂盒，适用于各种抗凝剂（柠檬酸钠、EDTA等）保存的全血和血凝块、白膜层等样本的DNA提取。采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和缓冲液系统，提取血液中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料，、一吸附DNA，可去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DN段大，纯度高，质量稳定。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern blot等实验。
产品特点：
■ 简单快速：1 小时内即可获得高纯度的基因组DNA。
■ 纯度高：可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
保存条件：
室温（15-25℃）保存
下游应用：
使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
自备试剂:无水乙醇
操作步骤
次使用请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1. 向15 ml离心管加入200 μl Proteinase K (20 mg/ml)溶液。
2. 处理材料：
a. 如果提取血液样本，直接加入0.5-3 ml血液样本，混匀。
b. 如果提取血凝块样本，将一个血凝块液化柱CX2（选配组分，目录号：RK166）放入
上述装有Proteinase K溶液的15 ml离心管中，再向过滤柱加入0.5-3 ml血凝块样本，
6,000 rpm（~8,228×g）离心1 min。
注意：也可以先将血液样本加到离心管中，或者先将处理后的血凝块样本离心收集到离心
管中，再加入ProteinaseK，但要混匀。
3. 向装有血液样本的离心管中加入2.4 ml缓冲液GE，振荡30 sec混匀。
注意：若提取2-3 ml样本，可以增加缓冲液GE用量至3.6 ml。如果需要去除RNA，可加
入40 μlRNase A（100 mg/ml）溶液（选配组分，目录号：RT405-12），振荡15 sec，
室温放置5 min。
4. 65℃放置10 min，每隔3 min振荡一次，以助裂解。简短离心以收集管盖内壁的水珠（如
遇特殊样本，未能很好裂解，请适当延长孵育时间）。
5. 向样本中加入2 ml无水乙醇，混匀，此时可能出现絮状沉淀。
注意：若从水浴锅取出的样本温度过高，请在室温冷却后再加入无水乙醇。若提取2-3 ml
血液样本，可以增加无水乙醇量至3 ml。
6. 将上一步所得溶液和絮状沉淀的一半转移至一个吸附柱CB5中（吸附柱放入15 ml收集管
中），3,000 rpm (~1,850×g)离心3 min，倒掉废液，将吸附柱CB5放回收集管中。
7. 将步骤6剩余的溶液再转入同一个吸附柱中，重复步骤6操作。
8. 向吸附柱CB5中加入2 ml缓冲液GD（使用请先检查是否已加入无水乙醇），5,000 rpm
(~4,500×g)离心1 min，倒掉废液，将吸附柱CB5放回收集管中。
9. 向吸附柱CB5中加入2 ml缓冲液PW（使用请先检查是否已加入无水乙醇），5,000 rpm
(~4,500×g)离心1 min，倒掉废液，将吸附柱CB5放回收集管中。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
