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技术文章
超强高保真PCR试剂盒说明书
点击次数：3692 发布时间：2021/5/25 9:16:42
产品简介
Ultra HiFidelity PCR Kit是一种新型高保真PCR扩增预混液，适用于PCR相关的克隆和检测。
扩增预混液中的Ultra HiFi DNA Polymerase是通过定向分子进化技术开发得到的新型快速高保真DNA聚合酶，增强了DNA聚合酶对模板的亲和力，使得此酶在扩增速度和延伸能力上得到了提升，增加了PCR成功率和产物量。同时，此酶具有优良的3’- 5’外切酶活性（Proofreading活性），保真性可达市场上主流产品水平，基因和文库扩增过程中的真实性。此外，本产品中的DNA聚合酶具有热启动（Hot Start）功能，可的控制低温情况下的非特异扩增和酶活损耗，进而了PCR扩增的特异性和稳定性。
本产品为一管式预混Mix形式，内含热启动型的Ultra HiFi DNA Polymerase、超纯dNTPs、MgCl2、反应缓冲液等PCR反应所需组分，只需加入模板和引物即可进行PCR扩增反应，操作简便。除此之外，本产品中还整合了PCR Enhancer组分，可以提高Ultra HiFidelity PCR Kit对PCR反应抑制剂的耐受能力和对不同GC含量模板的适应能力，因此可以在扩增结构复杂的产物和PCR抑制剂含量较高的PCR体系时添加使用。
产品特点
• 操作简便—2×预混Mix形式，只需加入模板及引物即可进行PCR
• 高保真性—保真度为Taq聚合酶的50倍
• 高特异性—具有优良的热启动性，产物特异性
• 快速扩增—延伸速度可达10-15 sec/kb
• 延伸力强—可扩增长至20 kb的DNA片段
• 试用广泛—试剂盒包含PCR Enhancer，适合于高GC和复杂模板扩增
实验数据
1. 具有超强热启动性的高保真扩增试剂盒
Ultra HiFi具有热启动（Hot Start）功能，防止PCR反应的引物错配和引物降解，扩增产物的特异性。使用分子信标法（Ma et al., Anal Biochem, 2006）检测不同高保真酶的热启动性，结果表明TIANSeq HiFi真正具有热启动活性，其余产品热启动活性差，在40-50度时均有链退火和延伸能力。
2. 保真性为Taq酶的50倍
3. 普适性强、特异性高，不同来源的高GC和长片段均能轻易阅读
Ultra HiFi具有高特异性，针对于不同类型模板扩增成功率及产物量。
图A. Ultra HiFi扩增结果
图B. 国外竞品K公司高保真酶扩增结果
图C.国外竞品K公司高保真酶扩增结果
1. 750 bp; 2. 1kb; 3. 2kb;4. 4kb; 5. 6kb; 6.1915 bp (GC%为70%); 7.大鼠; 8.水稻; 9.小麦; 10.玉米; 11.细菌; 12.水稻; 13.玉米; 14.细菌; 15λDNA (15kb)
M：TIANGEN D15000 Marker
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
