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技术文章
新产品磁珠法土壤和粪便基因组DNA提取试剂盒
点击次数：3609 发布时间：2021/5/24 9:00:14
产品简介
本试剂盒采用独特的脱腐缓冲液系统，可以将土壤样本中的腐植酸尽可能的去除，并且配有的玻璃珠可有效破碎土壤样本中的各种复杂成分，保证从土壤中提取基因组DNA 的完整性。同样适用于粪便样本以及肠道微生物的提取。
产品特点
适用范围广：适用于花坛土、花盆土、农田土、山林土、淤泥、红土、黑土、粉尘等多类土壤环境样本的提取，同样适用于粪便样本的提取。
操作便捷：能够集中在相对较短时间内完成实验操作。
高纯度：与磁珠法纯化相结合，提取的DNA纯度高，可直接用于下游实验。
保存条件
该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12 个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中孵育10 min，以溶解沉淀。
选配试剂
RNase A（10mg/ml） （TIANGEN，目录号：RT405-02）
实验例
操作步骤
使用请先在缓冲液GFA中加入异丙醇；在去蛋白液RD和漂洗液PWD中加入无水乙醇，加
入体积请参照瓶上标签。
1. 样本处理
1）土壤样本处理：
在2 ml离心管中加入样本0.25-0.5 g，加入500 µl缓冲液SA、100 µl缓冲液SC和0.25 g研
磨珠，涡旋振荡15 min至样本混匀或使用TGrinder H24组织研磨均质仪（OSE-TH-01）
混匀（6M/S的速度振荡30s，间隔30s，共2个循环）。12,000 rpm (~13,400×g ) 离心1
min，转移上清液（约500 µl）至新的2 ml离心管。
注意：针对一些得率低或需提取真菌基因组的样本，建议涡旋震荡混匀或组织匀质仪震
荡混匀后70℃加热裂解15 min以提高裂解效率。
2）粪便样本处理：
在2 ml离心管中加入样本0.25-0.5 g，如果是液态样本则转移200 µl至离心管中，加入500
µl缓冲液SA、100 µl缓冲液SC和0.25 g研磨珠，（粪便样本中可能有RNA残留，如果需
要去除RNA，建议再加入10 µl RNase A（TIANGEN，RT405-02， 自备））涡旋震荡混
匀或组织匀质仪震荡混匀后70℃加热裂解15min提高裂解效率。12,000 rpm (~13,400×g
) 离心1 min，转移上清液（约500 µl）至新的2 ml离心管。
注意：对于较难破壁的革兰氏阳性菌，可将温度提高至95℃以促进裂解。
2. 加入200 µl缓冲液SH混匀，涡旋5 sec，4℃放置10 min。
3. 12,000 rpm (~13,400×g ) 离心3 min，转移上清液至新的2 ml离心管，加入500 µl缓冲液
GFA（使用请先检查是否已加入异丙醇），颠倒混匀。
注意：转移上清时不要移走沉淀，否则可能降低DNA纯度。
4. 加入10 µl磁珠悬浮液G，振荡混匀5 min。
注意：为了确保磁珠彻底重悬，请在使用振荡混匀
5. 将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
