LAMP TaqMan与TaqMan PCR检测法的原理及差异比较_分析方法_技术文章

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技术文章

LAMP TaqMan与TaqMan PCR检测法的原理及差异比较

点击次数：3752 发布时间：2021/3/26 9:58:03

LAMP TaqMan与TaqMan PCR检测法的原理及差异比较

性能指标

单管两重设计，使得检测数据更可靠，避免样本误差带来的假阴性。非洲猪瘟病毒的P72基因，外加猪内参beta-actin基因。
有效灵敏度为200个病毒/拭孖，限灵敏度为50个病毒/拭孖；灵敏度为单copy水平。
采用特异性的双标TaqMan探针，准确性100%，无假阳性。
全程闭管检测，25min内完成检测；在每个检测管中含有100个病毒以上的样本，10min内即可完成检测。
咽拭孖、鼻腔拭孖和肛拭孖，核酸免提取。
匹配便携恒温荧光检测设备，可在野外、社区、家庭、工作场所，任何环境下操作。
操作简便、易学、易懂，无需复杂的培训工作

P72基因靶标序列

TTTGTGCCGGGTACAATGGGTCTTCCAAAAGGATCTACAAGCGTGTAAACGGCGCCCTCTAAgGGTGTTTGGTTGTCCCAGTCATATCCGTTGCGAGGAAACGTTTGAAGC
TGCCCATGGGCCCCCATCTGGGACGTGCCCTGAATCGGAGCATCCTGCCAGGAtGAATGACATGCACCCAATATATGATGGCCCACCATATCATGGAAAAAGTCTCCGTACT
GGGGAATACCAAAGGTAAGCTTGTTTCCCAAGGTGGGGGTACCCGTATGCGGGCGTACTTTA

LAMP TaqMan与TaqMan PCR的原理比较

LAMP TaqMan与TaqMan PCR的差异比较

	TaqMan PCR法	恒温荧光探针法
扩增条件	95-60℃循环变性、复性扩增	60℃恒温滚环扩增
引物靶标区域	3个特异性区域	9个特异性区域
信号放大别	倍数（增加2倍/循环）	指数（增加10⁷倍/min）
探针形式	双标记切割探针	双标记切割探针
报告基团	荧光基团，通常FAM	荧光基团，通常FAM
反应时间	35~60min	15~25min
是否可采用粗制核酸	全血或溶血样品必须提取核酸	所有样品可直接使用
所需的设备	标准定量PCR仪	可以使用标准定量PCR仪也可以使用便携式恒温荧光仪
是否可野外操作	否	可以
敏感度	>50 Copy易判读	单Copy易判读
特异性	偶有假阳性	无假阳性