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技术文章
植物组培胚胎培养
点击次数：3677 发布时间：2021/1/22 10:31:30
胚及胚器官（如子房、胚珠）在离体无菌条件下，使胚发育成幼苗的技术。包括幼胚培养、成熟胚培养、胚珠培养、子房培养、胚乳培养等。
胚胎培养史：已有近百年，1904年的Haning次培养了萝卜和辣椒的胚，并萌发形成小苗。30年代把兰科植物的胚培养成小植株。40年代进行苹果、桃、柑桔、梨、葡萄、山楂、马铃薯、甘蓝与大白菜的种间杂种的胚胎培养、胚乳培养及子房与胚珠培养。
（）胚胎培养的意义
１．克服远缘杂种的不育性 用胚胎培养和试管受精技术，解决种间和属间胚败育，胚发育不全，而不能正常萌发的问题。
２．使胚发育不全的植物获得后代。如兰花、天麻的种子成熟时，胚只有6～7个细胞，多数胚不能成活。分离出这此些未成熟胚进行培养，得到正常植物。
３．缩短育种年限 应用胚培养技术可以缩短育种周期1～2年。
（二）离体胚培养
胚发育过程：受精→受精卵→合子→第次分裂→分生组织和幼胚→成熟胚。在这个过程，胚靠消耗胚乳的营养而发育，同时胚处在胚囊环境中，可吸收氨基酸、维生素等营养。
离体胚培养包括成熟胚和幼胚培养。
１．成熟胚培养 指子叶期后至发育完全的胚。
培养较易成功，在含有无机大量元素和糖的培养基上，就能正常生长成幼苗。将成熟或未成熟种子→70%酒精表面消毒→无菌水冲洗3～4次→无菌条件下进行解剖，取出胚并接种在适当的培养上培养。
２．幼胚培养 幼胚是指子叶期以的幼小胚，现在可对心形期胚或更早期(0.1～0.2mm)的胚进行培养。
胚越小就越难培养，现在大麦、荠菜、甘蔗、甜菜、胡萝卜等幼胚已培养成功。
I)操作方法：与成熟胚培养基本相同，切取幼胚必须在高倍解剖镜下进行，操作时要特别细心，尽量取出完整的胚。
II)培养方式：常见有三种明显不同的生长方式：
第种是继续进行正常的胚胎发育，维持“胚性生长”；
第种是在培养后迅速萌发成幼苗，而不继续进行胚性生长，通常称为“早熟萌发”；第三种是发生细胞增殖形成愈伤组织，并由此再分化形成多个胚状体或芽原基。特别是加有生长调节剂时，就更为如此。
III)影响因素：包括提供幼胚所必需的营养和环境条件。影响条件如下：
1.培养基 成熟胚对培养基要求不高，而幼胚要求较高，常用的培养基有Tukey、MS、B5、Nitsch培养基，其中者适于成熟胚培养，其它适于未成熟胚和幼胚培养。
幼胚需要较高的蔗糖浓度，提供较高的渗透压。由于幼胚在自然条件下赖以生存的是无定形的液体胚乳，具有较高的渗透压，人工培养基中要创造高渗透压的条件，它可以调节胚的生长，阻止可能的渗透压影响，还能抑制中早熟萌发中的细胞延长，以及抑制胚的萌发，避免把细胞的伸长状态转化为分裂状态。
2.生长调节物质 不同植物的胚培养需要的生长物质不同，如IAA可明显促进向日葵胚的生长。IAA,Kt的共同作用可促进荠菜幼胚的生长。般认为IAA可使胚的长度增加；加入BA可提高胚的生存机会。
3.天然提取物
椰乳对胚培养有定的促进作用，如番茄胚在含有50%椰乳的培养基中可维持生长。
瓜类的胚乳提取物也能促进胚生长的能力，可能是植物激素的细胞分裂物质和些有机氮化合物作用的结果。
4.温光条件 大多数植物的胚在25～30℃为宜，但是，早熟果树(如桃)必须经过定的低温春化阶段才能正常萌发生长。
光照可以促进某些植物的胚转绿，利于胚芽生长，而黑暗利于胚根生长。因此以光暗交替培养较为有利。
5.其它条件 胚培养中还要求较高浓度的氨基酸及无机盐。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
