企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：9年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：7955499
手机网站：http://wap.app17.com/c137908/
旗舰版网址：http://www.yajiml.com
技术文章
线粒体活性氧ROS检测试剂盒-橙红色荧光
点击次数：3317 发布时间：2023/6/12 8:43:06
产品概述 product description
OM08线粒体ROS检测试剂盒是利用OM系列探针进行线粒体ROS特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的OM08线粒体ROS染色探针为红色荧光标记的线粒体探针，具有510/580nm的D激发/发射波长。 OM08线粒体ROS染色探针是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色的一类新型荧光染料，该探针可以选择性标记线粒体，包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞，即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。一旦进入线粒体后，快速被ROS氧化，并产生红色荧光。 OM08线粒体ROS染色探针只可被ROS氧化，而不被其他部位活性氧类(ROS)和活性氮类(RNS)氧化。氧化产物结合核酸后，可产生大量红色荧光。 系列线粒体探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针，还可以提供绿色、蓝色、橙色等颜色的染色试剂盒。 按每个样用200 μl染料计，试剂盒可以做30-150个样或60-300个样；按每个样用100 μl染料计，试剂盒可以做60-300个样或120-600个样。 以提供针对各种类型活性氧、活性氮的检测试剂盒。 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
2.可以根据需要分装后冻存。
3.探针为DMSO溶液，在2-8℃时是固体状态，冬季气温较低时为凝固状态，易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
2.贴壁细胞
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.吸头
3.一次性手套
4.黑色96孔板
2.使用，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定J条件。以下方法仅供参考。
5.染色后立即进行分析。
根据样本数量，用染料稀释液将 OM08荧光染料10倍稀释，再用HBSS缓冲液或者相应的培养基10-50倍稀释，配制成染色工作液。
2. 细胞染色
2.1 对于贴壁细胞
1）培养皿/培养板准备细胞样本。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下避光孵育10分钟～30分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）利用新鲜培养基替换上述染色液。
4）荧光显微镜（含合适滤片）或激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪下观察。D激发/发射波长为510 / 580nm。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下避光孵育10分钟～30分钟（具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察。或流式细胞仪、荧光酶标仪检测。D激发/发射波长为510 / 580nm。
激光共聚焦显微镜检测：
1. 对贴壁生长细胞或活组织，可直接在荧光显微镜下观察；对悬浮生长细胞，取25-50 μl细胞悬液滴到一张显微载玻片上，再盖上一张盖玻片。
2. 荧光显微镜下，用510 nm激发，观察和拍摄细胞580 nm发射图像，ROS阳性细胞被染成橙红色。
流式细胞仪分析：
1. 对贴壁生长细胞，用胰酶消化制备成单细胞悬液；对悬浮生长细胞，直接收集细胞。用0.5~1 ml冰冷PBS重悬细胞（5~10万）。
2. 采用510 nm波长激发，测定580 nm的发射，细胞应可分成两个亚群：ROS阴性细胞仅有很低的荧光强度，ROS阳性细胞有较强的红色荧光。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
