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技术文章
Tris聚丙烯酰胺电泳预制凝胶
点击次数：3346 发布时间：2023/5/29 11:19:19
产品信息：
预制胶选择指南：
在蛋白实验中，通常使用固定浓度胶和梯度胶两种，与固定浓度胶相比，显然梯度胶具有更大优势。先，梯度胶的分离范围更宽，可以同时分离较大范围分子量的蛋白质。梯度胶的顶部孔径较大，底部孔径较小，分子量较大的蛋白质可以在凝胶顶部大孔径部分得到分离，同时分子量较小的蛋白质可以在凝胶底部小孔径部分得到分离。
另一个优点是梯度胶可以分辨分子量相差较小，在固定浓度胶中不能分辨的蛋白质。电泳过程中，蛋白质在梯度胶中迁移，经过的孔径越来越小，直到凝胶的孔径不能通透，这样电泳过程中蛋白质就被浓缩，集中在一个很窄的区带中。而分子量略小的蛋白质可以迁移得更靠一些，被集中在略面的区带中。由于梯度凝胶孔径逐步变小，在蛋白质不能通透的孔径附近对蛋白有浓缩作用，所以电泳后形成很窄的区带，可以分辨出分子量相差较小的蛋白质。
在蛋白分离范围相同的情况下，梯度胶的选择主要取决于目的蛋白的大小，虽然都可以分离10-250 kD的蛋白，但浓度为4-12%的梯度胶对55 kD以上的蛋白分离效果更好，而浓度为4-20%的梯度胶则更利于分离55 kD以下的蛋白。凝胶分离范围
产品优势及常见问题解答
产品优势：
1.方便：即开即用，无需配制溶液和灌胶操作，并附送足量的电泳缓冲液，简化操作步骤，缩短实验时间，每天都有新结果；
2.快捷：电泳时间短，在150V电压下，电泳40-50分钟即可完成，再也不用熬夜做WB啦；
3.安全：无需接触有毒、刺激性试剂，和屏住呼吸加试剂say byebye；
4.兼容性强：兼容目市场各种电泳槽，无论是BIORAD，天能还是君意东方，通通百搭；
5.应用广泛：SDS变性及非变性电泳一胶搞定；
6.重复性好：通过全自动、大规模的凝胶灌注技术，品质稳定，保每片胶之间良好的重复性，重复实验补数据也不怕；
7.结果清晰：独特的凝胶缓冲配方使蛋白电泳条带更为清晰，锐利，均匀，分辨率更高；配套的MOPS Running Buffer为中性缓冲液，可以提高凝胶稳定性并避免蛋白在电泳过程中的再修饰。条带平整、清晰、锐利，无边缘效应，让你的WB结果张张精品。
常见问题解答：
1.指示剂偏斜
可能原因：电泳槽漏液
解决办法：调整胶板位置，检查密封条。
2.蛋白条带拖尾
可能原因：样品溶解不佳或者降解
解决办法：样品加热，离心取上清或重新制备新鲜样品。
3.指示剂呈倒三角状，即两边低、中间高，形成峰顶
可能原因：内、外槽电泳液量不够
解决办法：补满内槽电泳液，外槽电泳液补至2/3高度。
4.指示剂出现弧度
可能原因：底部出口被电泳槽上胶条部分覆盖或者胶板底部没卡紧
解决办法：调整胶板位置，避免底部出口和胶条重合。
5.上半部分蛋白条带无端消失
可能原因：内槽或样品被蛋白酶污染
解决办法：清洗实验相关试剂、仪器，避免被蛋白酶污染。
6.WB曝光图蛋白条带不完整
可能原因：湿转时海绵里面有气泡没有排干净或者夹子没夹紧
解决办法：将海绵里面的气泡排干净；调整夹子的位置。
7.样品条带在凝胶中扩散状
可能原因：样品含盐类过多
解决办法：采用透析或者超滤除盐。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
