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技术文章
为你的转染实验保驾护航
点击次数：3501 发布时间：2020/12/21 9:52:25
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。那么，罗氏应用科学部都有哪些转染试剂，其优势都有哪些？本期带大家走进罗氏转染试剂的多彩。
X-tremeGENE 9 DNA 转染试剂
简介：
X-tremeGENE 9 DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的类多组份试剂，溶于80%乙醇中，经0.2 μm滤膜过滤，然后封装于玻璃小瓶中，适用于细胞分析的多种实验。
优势：
1.具有细胞毒性低、转染后细胞存活率高，生成可信任的生理学相关数据。
2.操作简便、节省时间，只需对X-tremeGENE 9 DNA转染试剂进行简单稀释，再与质粒DNA共同孵育，即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。
3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化工作。
X-tremeGENE HP DNA 转染试剂
简介：
X-tremeGENE HP DNA转染试剂是种高效的无动物源成分的低毒转染试剂，兼容含血清或不含血清的培养基，可用于转染各类核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。
优势：
1.简单易用的多组分混合试剂，无动物源性成分，室温稳定。
2.高转染效率，对于原代细胞和使用其它试剂难转染的肿瘤细胞系有高转染效率。
3.使用细胞毒性低的试剂，结果相关性好。
图2. X-tremeGENE HP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENE HP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENE HP，导致存活细胞量减少(图片来源于网络)。
图3. X-tremeGENE HP对难转细胞系的转染效果优于脂质体转染方法。应用GFP编码的质粒对人/鼠间充质干细胞进行转染。XHP 3:1表示用X-tremeGENE HP及相应的转染试剂(μl): 质粒DNA (μg)比例进行转染(图片来源于网络)。
X-tremeGENE siRNA 转染试剂
简介：
X-tremeGENE siRNA转染试剂种优化的多组分低毒试剂，能够向多种常用细胞系有效递送小干扰RNA(siRNA)作用于序列特异的目标基因，引发基因表达下调或基因沉默。
优势：
1.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。
2.高灵活应用， 同试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。
3.细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。
4.兼容含血清或不含血清的培养基，转染后均无需换液(如无血清培养基)。
图4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nM HPRT特异性siRNA转染至4种细胞。 通过LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
