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技术文章
大肠杆菌转化实验 一步法 高效率电转化法
点击次数：3490 发布时间：2020/9/25 11:13:04
| 实验材料 | 大肠杆菌 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | TSS 葡萄糖 LB |
| 仪器、耗材 | 离心机 分光光度计 摇床 |
| 实验步骤 | 1. 按1：100的比例将过夜培养的菌液如人到新鲜的LB培养液中，于37℃培养至为OD600为0.3~0.4。
2. 加入等体积的2x SS于菌液中，在冰上温和地混匀。
3. 将100 ul 感受恣细菌和1~5 ul DNA加入到一个冰冷的聚丙烯管或玻璃管中，4℃放置5~60 min。 |
高效率电转化法
| 实验材料 | 大肠杆菌 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | LB SOC |
| 仪器、耗材 | 电转化仪 离心机 分光光度计 |
| 实验步骤 | 1. 接种一个单菌落于5 ml LB培养液，37℃温和振摇培养5 h 或过夜。 3. 细菌在冰水浴冷却10~15 min，然后转移到预冷的1升离心瓶中。于2℃，5 000 g 离心20 min 沉淀用5 ml 预冷的水溶解6。 5. 新鲜制得的细菌 9. 将转化混合物转移到预冷的电转化池中，吸干池的外表面，然后放入样品槽中。 10. 进行脉冲电转化，然后取出电转化池，马上加入1 ml SOC培养液，并且用巴斯德吸管转移到无菌的培养管中。 |
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
