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技术文章
植物类黄酮（Flavonoid）试剂盒说明书
点击次数：3331 发布时间：2023/4/6 8:57:04
植物类黄酮（Flavonoid）试剂盒说明书
分光光度50管/48样
注 意：正式测定之选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
类黄酮是一类多苯化合物，属于植物次生代谢物，对人体具有消炎，抗菌，降血脂，清除体内羟自由基，预防癌症等作用。
测定原理：
在碱性亚硝酸盐溶液中，类黄酮与铝离子形成在510nm处有特征吸收峰的红色络合物，测定样品提取液在510nm处的吸光值，即可计算样品类黄酮含量。
自备实验用品及仪器：
天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：60%乙醇，自备。
试剂一：液体2mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体2mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。
类黄酮提取：
将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.02g，加入2mL提取液，60℃振荡提取2h，10000g，25℃，离心10min，取上清待测。
测定操作表：
|
| 空白管 | 测定管 |
| 样本待测液（µL） |
| 540 |
| 蒸馏水（µL） | 540 |
|
| 试剂一（µL） | 30 | 30 |
| 混匀，25℃静置6min | ||
| 试剂二（µL） | 30 | 30 |
| 混匀，25℃静置5min | ||
| 试剂三（µL） | 400 | 400 |
| 混匀，25℃静置15 min，测定510nm处吸光值。ΔA=A测定-A空白，空白管只要做一管。 | ||
类黄酮含量计算公式：
标准曲线：y = 5.02x+0.0007，R2 = 0.9996
类黄酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷5.02÷(W÷V样总)
= 0.398×（ΔA -0.0007）÷W
V样总：加入提取液体积，2mL； V样：反应中样品体积，0.54mL； W：样品质量，g
zui低检出限为10µg/g。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
