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技术文章
高铁血红蛋白还原检测试剂盒(比色法)
点击次数：3690 发布时间：2019/8/26 9:25:47
产品简介：
高铁血红蛋白还原检测试剂盒(比色法)
红细胞酶缺陷的检查可通过高铁血红蛋白还原实验、抗坏血酸、 Heinz 小体等检测， 源叶生物 高铁血红蛋白还原检测试剂盒采用Schumm 法，其检测原理是在有足够的NADPH 存在下，高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还原成亚铁血红蛋白，当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶含量正常时，由磷酸戊糖代谢途径生成的 NADPH 的数量足以完成上述还原反应当红细胞内 G6PD 含量不足或缺乏时，高铁血红蛋白还原速度减慢，甚至不能还原。高铁血红蛋白呈褐色，用分光光度计在 635nm 波长处检测。该试剂盒仅用于科研领
域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：
试剂(A): 抗凝剂
50T
5ml4℃
试剂(B): Hb Assay buffer
试剂(C): Hb 显色液试剂(D): G6PD buffer
1.5ml 1.5ml 100ml
4℃
4℃ 避光
4℃
自备材料：
1、离心管或试管
2、水浴锅或恒温箱
3、比色杯
4、分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、取新鲜静脉血 0.9ml，加入抗凝剂 0.1ml，充分混匀。
2、低速离心 15min，取出，调整血细胞与血浆比例为 1:1 后再混匀。
3、取上述抗凝血 0.5ml，加入 Hb Assay buffer 和 Hb 显色液各 0.025ml，颠倒混匀 15 次，使与氧气充分接触，加塞或密封后放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。混匀， 取上述血液 0.02ml 加入 G6PD buffer 2.0ml。上述操作，可见下表：
| 加入物(ml) | 空白管 | 测定管 |
| 抗凝血 | 0.5 | 0.5 |
| Hb Assay buffer | － | 0.025 |
| Hb 显色液 | 0.025 | 0.025 |
混匀，放置于 37℃水浴锅或恒温箱中孵育 3h。
取上述反应液0.020.02
G6PD buffer
2.0
2.0
4、混匀，室温放置 2min，比色杯光径 1.0cm，用分光光度计 635nm 处测定空白管和测
定管吸光度，分别命名为 SA和 B。
5、向空白管加入 Hb Assay buffer 0.025ml，混匀，室温放置 5min，再次用分光光度计635nm 处测定空白管吸光度命名为 ST。
计算：高铁血红蛋白还原率(%)={1-(SA-B)/(ST-B)}×100%
参考区间：一般应超过 75%
注意事项：
1、 红细胞比容低于 30%时，高铁血红蛋白还原率显著下降，需调整红细胞与血浆的比例。
2、 样本不应有凝血或溶血，以免影响测定。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6 个月有效。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
