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技术文章
细胞生长曲线实验
点击次数：3807 发布时间：2019/7/23 9:21:23
实验方法原理
细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮然后贴壁，随后度过长短不同的潜伏期，即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期，斜率较大的指数生长期，呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。
实验材料细胞
试剂、试剂盒D-Hanks液牛血清RPMI1640双抗0.08%胰酶
实验步骤
1. 取生长状态良好的细胞，采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液。
2. 计数，精确地将细胞分别接种于21～30个大小一致的培养瓶内或培养孔（以24孔培养板为宜），每瓶或孔细胞总数要求一致，加入培养液的量也要一致。
3. 每天或每隔一天取出3瓶（孔）细胞进行计数，计算均值。培养3～5 d 常要给未计数的细胞换液。
4. 以培养时间为横轴，细胞数为纵轴（对数），描绘在半对数座标纸上，连接成曲线后即成该细胞的生长曲线。
收起
注意事项
1. 细胞生长曲线虽然最为常用，但有时其反映数值不够精确，可有20～30%的误差，需结合其它指标进行分析。
2. 现在很多实验室利用培养板采用MTT法进行生长曲线测定，较为简便。
其他
1. 标准的细胞生长曲线近似“S”形，一般在传代后第一天细胞数有所减少，再经过几天的潜伏适应期，然后进入对数生长期，达到平台期后生长稳定，最后到达衰老。
2. 在生长曲线上细胞数量增加1倍时间称为细胞倍增时间，可以从曲线上换算出。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
