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技术文章

RNase抑制剂(人源)

点击次数:3926 发布时间:2019/6/4 8:32:07

产品及特点

本品是从细菌中分离的重组人RNase Inhibitor,其分子量为50 KD,能通过与
RNase A 1:1形成非共价的复合体而抑制后者的活性。本品属蛋白质性质,与其它竞争
性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中
除去。
1. 抑制范围广,可以抑制RNase A、RNase B、RNase C等RNase的活性,但不
能抑制RNase T1、RNase H、S1 RNase和Aspergillus RNase的活性。
2. 与SP6、T3和T7 RNA polymerase、AMV和MMLV逆转录酶、Taq DNA聚合
酶等兼容。
3. 在广泛的pH范围(pH 5-8)有活性。
4. 应用范围广,可以用于RT-PCR、cDNA合成、in vitro transcription or
translation等需要抑制RNase活性的酶反应中。
单位定义
抑制5 ng RNase A 50%的活性所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。RNase A
的活性通过水解Cyclic 2',3' -CMP定量求得。
备忘录
RNase Inhibitor
Ribonuclease Inhibitor(RI)是由450左右的氨基酸组成的、分子量在49 kDa左右
的酸性蛋白质(pI约4.7),能与某些ribonucleases形成非常精密的结构,参与调节细胞内
RNA分子的代谢。它占细胞总蛋白质重量的0.1% 左右,是一种主要的细胞蛋白质。RI 的
cysteine含量和leucine含量分别是~6.5%和21.5%,远高于它们在蛋白质中的平均值(分别是
1.7%和9%),但其他疏水氨基酸尤其是valine、isoleucine、 methionine、tyrosine、and
phenylalanine的含量很低。RI对氧化十分敏感,故其保存溶液中必须要有DTT。
RI形状为中空的马蹄型结构,骨架结构由很多重复的长度为57aa的结构单元组成(由一
个EXON编码),每个结构单元由一个α-helices(28 aa长)结构和一个平行β-strands(29
aa长)组成,两者转折处为asparagines,所有的α-helices组成弯曲的外围,平行β-strands
组成弯曲的内围,内外直径分别是 21和67,整体形状类似马蹄型。
RI能跟多种ribonucleases以类似于瓶口(RI)和瓶塞(RNases)的结合方式结合,结
合主要通过静电作用,其强度可能是所有protein-protein 结合中最牢固的; 在生理条件下RIRNase A的解离常数为20 fM,RI-angiogenin(血管紧张素,一种有重要心血管调节作用的
RNase)的解离常数

原创作者:上海雅吉生物科技有限公司

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