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技术文章
双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-荧光素647·7-AAD）
点击次数：4293 发布时间：2019/5/9 9:07:41
产品及特点
双染细胞凋亡检测试剂盒是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳
定等方面起着十分重要的作用。在细胞凋亡过程中，细胞内膜的磷酯酰丝氨酸外翻到
细胞外膜，而Annexin V（膜联蛋白V）对其有天然的高亲和能力，故可以用荧光素
647标记的Annexin V来检测细胞凋亡，但本方法的缺点是不能区分早期和晚期的凋
亡细胞。早期和晚期的凋亡细胞的一个重要区别在于细胞膜的完整性（凋亡早期细胞
没有丧失膜的完整性），故可以用7-AAD（7-amino-actinomycin D）来染色加以
区分。其原理图如下：
双染细胞凋亡检测试剂盒就是整合了上述两种方法的高灵敏的细胞凋亡检测试剂盒，它具有下列特
点：
1. 即开即用，不需要专门花时间准备各种成分。
2. 整合了Annexin V-荧光素647和7-AAD检测法的优点，提高了凋亡细胞检测的
灵敏度和特异性，本方法是目前最灵敏的细胞凋亡检测方法。
3. 7-AAD具有和PI相似的荧光特性，不能通过正常细胞膜，随着细胞凋亡的发生，
质膜对7-AAD的通透性逐渐增加。7-AAD发射波谱较PI窄，对其他检测通道干扰
更少。7-AAD红色荧光激发波长546nm，发射波长647nm。
4. Annexin V-荧光素647荧光激发波长650nm，最大发射波长665nm。流式细胞
仪检测时，建议采用FL4 通道检测。
5. 本产品和流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测兼容。
6. 本产品适用于培养细胞（悬浮或贴壁），不适用于组织样品。
使用及效果
2000rpm离心5分钟，收集悬浮细胞；胰酶消化液（无EDTA）消化收集贴壁细
胞。PBS洗涤细胞，2000rpm离心5分钟，收集1~5×105
细胞。取500 μL溶液A悬
浮细胞，加入5 μL溶液B，混匀，加入5 μL溶液C，混匀。室温避光反应5-15分钟。
一小时内荧光显微镜下观察或流式细胞仪检测
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
