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技术文章
SDS 残留检测试剂盒2023资料科研更新
点击次数：3337 发布时间：2023/3/1 9:30:02
SDS分子具有亲水和疏水两性特征，在基因工程蛋白质药物的提取、纯化及抗原的制备的过程中有重要的应用价值，可是SDS 的残留会对动物和人体产生毒副作用，因此随时监测SDS的残留有很重要的意义，本试剂盒采用特殊的含有染料的试剂，选 择性的结合样品中的SDS形成复合物，这种复合物通过提供的有机试剂萃取到有机相中，再通过比色的方法测定其浓度；而 未结合成复合物的染料在萃取后留在水相中，这样样品中SDS的含量就与被萃取到有机相中复合物在特定大吸收波长的吸 收值存在一定的线性关系，经测定在0.002%~0.014% SDS浓度范围内，标准曲线的线性关系良好。
运输和保存条件
常温下运输，收到后将溶液A室温避光保存，溶液B室温避光保存于通风处并注意远离明火，保质期两年。
产品组成
组分 | |
| 溶液 A 溶液 B |
1. 称0.01 g SDS粉末溶于10 mL蒸馏水中，制成SDS标准溶液。
2. 取8支2 mL离心管，按照下表平行操作。
| 管号 溶液 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| 蒸馏水 (pl) | 1000 | 980 | 960 | 940 | 920 | 900 | 880 | 860 |
| SDS 标准溶液(pl) | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 | 120 | 140 |
| SDS 终浓度(%) | 0 | 0.002 | 0.004 | 0.006 | 0.008 | 0.010 | 0.012 | 0.014 |
4. 再向每管中加入50 pl溶液A混匀。
5. 再向每管中加入1.5 mL溶液B，剧烈振荡充分混匀3 min ，进行萃取。
6. 室温5000 rpm (2000 g)，离心5 min，取上层液体。
7. 在分光光度计上测每管在A499处的OD值。
8. 重复步骤3~7 ，依据相同SDS浓度，取两次同浓度下测量A499处的OD值的平均值。
9. 以每管A499平均值为纵坐标，对应的SDS浓度为横坐标，在坐标纸上或Microsoft Excel软件中绘制标准曲线。
B ．未知样品中SDS浓度测定
1. 将样品作适当倍数的稀释。
2. 取3支2 mL离心管，其中两管各加入50 pl样品稀释液，另外一管加入50 pl蒸馏水作为空白对照。
3. 再向每管中加入50 pl溶液A，混匀。
4. 再向每管中加入1.5 mL溶液B，剧烈振荡充分混匀3 min ，进行萃取。
5. 室温5000 rpm (2000 g)，离心5 min，取上层液体置于分光光度计上测每管样品液在A499处的OD值。
6. 计算两管样品稀释液在A499处的OD值的平均值。
7. 根据两管样品稀释液在A499处的平均值，在标准曲线上确定出待测样品稀释液的SDS浓度。
8. 根据下列公式计算待测样品的SDS浓度。
9. 样品中SDS浓度(%) =样品稀释液中SDS浓度×样品稀释倍数。
注意事项
1. 溶液B易挥发且有一定毒性， 使用时请在化学通风橱中进行并做好防护措施。
2. 待测样品检测后的A499处OD值应在标准曲线范围之内，若超过此范围则需将样品酌情稀释。
3. 因为染料和SDS-染料复合物有相同的大吸收波长，当样品含有三酸时，会使水相中未被SDS结合的染料也被萃 取到有机相中， 增加了A499值从而影响实验结果的准确性。
4. 当SDS浓度低于0.002%时， 常见的离子盐、氨基酸、糖类和蛋白质对SDS浓度的定量有很大的影响。
5. 核酸物质如DNA可能干扰SDS浓度的定量，但含量在1 ng以下的DNA并不影响定量结果。
6. 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完 毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
7. 使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
8. 本试剂盒只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
