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技术文章
牛乳头瘤病毒PCR试剂盒2023科研资料更新
点击次数：3396 发布时间：2023/2/13 9:24:28
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| CAT#:13-11200 低温运输，-20℃保 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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牛乳头瘤病毒PCR试剂盒 Bovine Papillomavirus(BoPV) PCR Kit | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 使用手册V1.1
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| 产品及特点 | 牛乳头瘤病毒(Bovine Papillomavirus，BoPV) 会引起牛乳头瘤病，是一种传染性肿瘤病。该病易进而癌变,给养殖业等造成严重经济损失，对 BPV 的基因型、基因结构及其功能和致病机制方面的研究有较大阻碍,为深入研究BPV致癌潜能及抗病毒疫苗的开发提供参考，因此牛乳头瘤病毒的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用，本产品就是根据PCR原理开发的门检测牛乳头瘤病毒的试剂盒，它具有下列特点： 1. 即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。 2. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。 3. 产品精心优化且特异性高，引物是根据牛乳头瘤病毒DNA高度保守区设计，不会跟除此之外的其它微生物DNA发生交叉反应。 4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。 5. 本产品足够50次20μL体系的PCR反应。 6. 本产品只能用于定性实验，不能用于定量。 7. 本产品只能用于科研。 |
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| 规格及成分 |
注：为避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供一的核酸片段作为阳性对照。 |
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| 运输及保存 | 低温运输，-20℃保存，保存期限为12个月。 |
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| 自备试剂 | 样品DNA |
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| 使用方法 | 一、样品DNA的制备 1. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取反应，多出的两个中一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL牛乳头瘤病毒PCR阳性对照（1×10E6拷贝/μL，本试剂盒提供）再加上一定量的水作为制备的阳性对照（加水后其总体积跟样品一样，样品体积多少取决于所用试剂盒的要求）。可以用水作为制备的阴性对照。 2. 用自选方法纯化上述N+2个样品的DNA。本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。 二、设置PCR反应（20μL体系） 3. 标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的DNA样品，额外增加的两个管一个用于PCR阳性对照，另一个用于PCR阴性对照。按照下表在各PCR管中加入下列成分：
4. 上机进行PCR，PCR反应参数为:
三、电泳分析 5. 取5-10uL扩增产物进行常规琼脂糖电泳，检测扩增效果，由于扩增产物较短，建议用1.5%-2.0%的琼脂糖凝胶。 6. 阳性样品预期得到的扩增产物长度为200bp左右。如果两个阴性对照（样品制备阴性对照或PCR阴性对照）有此扩增产物，说明环境污染，则整个实验无效，不需要分析实验结果。 7. 如果所有样品和PCR阳性对照均无此扩增产物，则说明有系统性的问题（试剂、设备、程序、操作等），需要重复并排查原因。 8. 如果没有上述两种情况，则实验有效，可以分析样品的扩增结果。N+2个样品中有扩增产物的判定为阳性，无则判定为阴性。 |
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| 关联产品 | 牛乳头瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 |
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原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
