企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
90成长值
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：9年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：7957985
手机网站：http://wap.app17.com/c137908/
旗舰版网址：http://www.yajiml.com
技术文章
巨噬细胞靶向胆固醇还原酶 DHCR7 抑制剂2022科研资料已更新
点击次数：3353 发布时间：2022/11/28 8:58:47
文章亮点
多种感染可下调巨噬细胞 DHCR7 的表达，但上调 AKT3 的表达。
DHCR7 和 7-DHC 的缺乏激活 PI3K-AKT3 途径
AKT3 结合 IRF3 促进 IRF3 Ser385 磷酸化，以满足 IRF3 全激活需求。
胆固醇代谢影响先天免疫应答，以抗感染。7- 脱氢胆固醇还原 (DHCR7) 是一种催化 7- 脱氢胆固醇 (7-DHC) 转化为胆固醇的酶，是胆固醇生物合成的后一步。那么研究人员是如何发现 DHCR7 在抗病毒中的重要作用，并且进行验证的呢？
先，研究人员对肝炎感染病人的样本、多类病毒感染的小鼠肝组织或巨噬细胞进行基因筛选，发现 DNA 和 RNA 病毒感染后巨噬细胞会降低 DHCR7 的表达。敲除或者沉默 Dhcr7 基因证明: 靶向 Dhcr7 启动一种未知的机制激活干扰素调节因子 3 (IRF3) 磷酸化，继而上调 IFN-I 的转录，增强抗病毒能力。
图 1. DHCR7 抑制 IRF3 的激活导致 IFN-I 转录的降低
DHCR7 酶活对调节 INF-β 至关重要，研究人员利用 DHCR7 抑制剂处理巨噬细胞发现，在水疱性口炎病毒 (VSV)、寨卡病毒 (ZIKV) 中 Ifnb 的表达量升高；通过抑制 DHCR7 可以预防巨噬细胞受 VSV、ZIKV 感染。
图 2. DHCR7 抑制剂 AY9944 和 Tamoxifen 保护巨噬细胞免受多种病毒感染
研究人员利用流式细胞术及 LC-MS 确定了抑制剂的处理后总胆固醇降低，体 7-DHC 的浓度显著上调。为了探究 DHCR7 对 Ifnb 产生的影响是由于 7-DHC 的积累还是胆固醇的降低，加入 MβCD 标记胆固醇 (MβCD-CH) 或者切除 RAW264.7 细胞的 DHCR7 表达基因 (7-DHC 积累，无胆固醇），证明了 7-DHC 的积累诱导 Ifnb 高表达且增强细胞的病毒清除能力。
7-DHC 的积累、抑制剂 AY9944 处理或缺失 DHCR7 都破坏了细胞膜稳定性，上调 p85 的磷酸化，增强 PI3K 活性。抑制 PI3K 则阻断 Ifnb 的表达增强。从 PI3K 的下游入手，发现 AKT3 是 7-DHC 积累的关键下游效应器，导致感染后 IFN-β 升高。
图 3. 靶向 DHCR7 整合胆固醇代谢和激活 AKT3 以增强抗病毒反应
通过质谱和点突变确认了 AKT3 和 TBK1 通过作用于 IRF3 的 S385A 和 S386A 位点，上调 IRF3 的磷酸化水平， AKT3 和 TBK1 过表达及缺失实验证明，AKT3 作为一种关键激酶，特异并主要上调 IRF3 S385 磷酸化，而 TBK1 则进一步诱导 S386 磷酸化，从而实现 IRF3 全二聚化。通过突变与感染 VSV 巨噬细胞，证明了 7-DHC 依赖于 AKT3 调节 IRF3 Ser385 的磷酸化。
后，研究人员用小鼠进行体内验证了，DHCR7 抑制剂 AY9944 保护小鼠免受病毒感染，降低小鼠死亡率，证明了靶向 DHCR7 能有效预防病毒感染。
图 4. DHCR7 抑制剂 AY9944 保护小鼠从各种病毒感染
原文链接：Xiao J, et al. Targeting 7-Dehydrocholesterol Reductase Integrates Cholesterol Metabolism ａnd IRF3 Activation to Eliminate Infection. Immunity. 2019 Dec 20.
作者阐明了 DHCR7 在巨噬细胞抗病毒反应中的作用，并且发现了 DHCR7 抑制剂通过激活 AKT3 和 IRF3 以促进 IFN-1 的产生和抗病毒反应，为病毒预防的研究提供了新的靶点。
相关产品
AY 9944 是一种特异的胆固醇生物合成 (cholesterol biosynthesis) 抑制剂。 AY 9944 抑制 7- 脱氢胆固醇 Δ7- 还原酶 (DHCR7) 酶 (IC50 =13 nM)。AY 9944 引起胆固醇不足和 7DHC 积累。在高剂量下，AY 9944 也可在培养的胚胎中抑制固醇 Δ7-Δ8 异构酶，这会导致胆固醇 8-en-3β-ol 的积累。
Tamoxifen (ICI 47699) 是一种选择性雌激素受体调节剂 (SERM)，可阻断乳腺细胞中的雌激素作用，并可激活其他细胞，如骨骼，肝脏和子宫细胞中的雌激素活性。Tamoxifen 是一种有效的 Hsp90 激活剂，可增强 Hsp90 分子伴侣 ATPase 的活性。Tamoxifen 能以高亲和力结合抗雌激素结合位点 AEBS (由 D8D7I 和 DHCR7 组成的异质低聚复合物)。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
