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技术文章
同型半胱氨酸 (HCY) 检测试剂盒2022科研资料已更新
点击次数：3418 发布时间：2022/11/14 9:16:29
同型半胱氨酸 (HCY) 检测试剂盒说明书
(货号：E031-1-1 循环酶法)
一、试剂用途本试剂盒用于定量测定血清中同型半胱氨酸含量。
二、测定原理
氧化型同型半胱氨酸经三乙羧乙基膦 (TCEP) 还原形成游离 型 HCY ，游离型HCY 与底物反应，循环放大， 同时产生腺苷。 腺苷立即水解成氨和次内嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下， 使 NADH 转换成 NAD+ ，通过检测反应中NADH 转换的吸光率降 低速率，计算 HCY 的含量。
三、试剂组成
| 规 格 | 组 份 | 浓度 | |
试剂一 (R1) | 37mL×2 | S-腺苷甲硫氨酸 | 0.1mmol/L |
| NADH | 0.3mmol/L | ||
| 三 (2-羧乙基) 磷氯化氢 | 0.5mmol/L | ||
| α-酮戊二酸 | 5.2mmol/L | ||
试剂二 (R2) | 10mL×2 | HCY 甲基转移酶 | 6.0kU/L |
| 谷氨酸脱氢酶 | 12.0kU/L | ||
| S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 | 3.8kU/L | ||
| 腺苷脱氨酶 | 5.6kU/L | ||
| 甘露醇 | 0 2% | ||
| 叠氮化钠 | 0.3‰ | ||
| 标准品一 | 1mL×1 | 同型半胱氨酸 | 0μmol/L |
| 校准品二 | 1mL×1 | 同型半胱氨酸 | 28.0μmol/L |
四、储存条件及有效期
原包装试剂在 2-8°C 避光储存，12 个月内有效。
五、适用仪器
日立 7080 全自动生化分析仪
奥林巴斯AU400 全自动生化分析仪
雅培C8000 全自动生化分析仪
东芝-40 全自动生化分析仪
六、操作步骤
样品要求：适样本为当日空腹采集的无溶血，无乳糜的血清。 分光光度计法
| 测定管 | 空白管 | 标准管 | |
| 样本 (μL) | 39 | ||
| 标准品一 (μL) | 39 | ||
| 标准品二 (μL) | 39 | ||
| 试剂一 (μL) | 720 | 720 | 720 |
| 混匀，37°C 孵育 5min | |||
| 试剂二 (μL) | 195 | 195 | 195 |
| 混匀，37°C 下孵育 2 分钟后，340nm ，0.5cm 光径，蒸 馏水调零，测定吸光率 A 初始 ，37°C 孵育 2 分钟后测定 吸光率 A 终止 ，计算ΔA/min= (A 初始-A 终止 ) /2。 | |||
| 温 度 | 37℃ | 方 法 | 速率法 |
| 反应方向 | 向下 | 血清+R1 反应时间 | 300 (或生化仪固定设置) |
| 定标方式 | Linear | 血清+R1+R2 延迟时间 | 120 |
| 样本量 | 13μL | 主波长 | 340nm |
| 试剂一 | 240μL | 副波长 | 405nm |
| 试剂二 | 65μL | 检测时间 | 120 |
A测定/min - A空白/min
A标准 /min - A 空白/min
C 标准：标准品二中 HCY 浓度，28μmol/L。
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
